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科华生物工程公司生化试剂SOP标准操作程序DOC(65页)

资料大小:48KB(压缩后)
文档格式:DOC
资料语言:中文版/英文版/日文版
解压密码:m448
更新时间:2015/5/3(发布于四川)

类型:金牌资料
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文本描述
ALT/GPT 丙氨酸氨基转移酶试剂盒

临床意义:
本试剂盒适用于体外临床检验,用于测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活力。

临床上,有许多疾病会导致血清中丙氨酸氨基转移酶活力增高。如肝胆类疾病:包括传染性肝炎、肝癌、肝硬变活动期、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎;心血管疾病:包括心肌梗塞、心肌炎、脑出血等。一些药物和毒物也可以引起ALT活性升高:如氯丙嗪、异烟肼、奎宁、酒精、铅、汞、有机磷等。

因此,血清丙氨酸氨基转移酶活力的测定可用于这些致病的诊断和监测,特别是用于肝胆类疾病的诊断和肝功能检测
方法原理:
上海科华生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒以IFCC1(国际临床化学委员会)推荐法为基础设计,采用两步法测定:
丙氨酸氨基转移酶
L-丙氨酸 + α-酮戊二酸 ----------→ 丙酮酸 + L-谷氨酸
乳酸脱氢酶
丙酮酸 + β-NADH + H+--→L-乳酸 + H2O + NAD+
底物L-丙氨酸和α-酮戊二酸在丙氨酸氨基转移酶催化下,生成丙酮酸和L-谷氨酸.其中丙酮酸在乳酸脱氢酶的催化下,生成了L-乳酸,并同时引起了β-NADH的氧化,使波长340nm处的吸光度下降.
在一定底物浓度范围内,β-NADH的氧化所引起的340nm处吸光度的下降速率与血清中丙氨酸氨基转移酶活力成正比。

样本:
病人准备:应空腹取血。

样本类型:新鲜无溶血现象的血清或EDTA抗凝血浆。

最少样品量:0.2ml。

样本稳定性:血清中的ALT在2~8℃可稳定7天,不推荐使用冰冻保存的样本2。

仪器与试剂:
仪器:魅力1800生化分析仪
试剂:上海科华生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒
试剂准备:丙氨酸氨基转移酶试剂盒为即开即用的液体双剂型,无需特殊准备。试验用试管的直径在12~16mm。

试剂组份:
参见试剂盒内说明书。

注意事项:
1.此试剂为体外诊断用。

2.试剂有毒,不要入口,吞下有害,如误服(包括内部接触)应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛,皮肤及粘膜接触,如不慎接触(外部接触)应用大量的水冲洗受损害的部位, 如仍有不适,应前往医院诊治。

3.试剂中含有叠氮钠,可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物,如果排向下水道请用大量的水冲洗。

性能参数:
1.精密度(重复性):
批内变异系数≤5%;
批间相对极差 ≤6%。

2.准确度:
相对偏差≤15%。

3.病人结果可报告范围(线性范围):
0~1000U/L(37℃)。

4.分析特异性(抗干扰能力):
本液体试剂以IFCC推荐法为基础设计,采用二步法,可防止胆红素的干扰。

5.稳定性:
试剂在2~8℃避光保存,有效期为1年;
试剂开启后在2~8℃避光保存,可稳定30天。

变质指示:
如试剂混浊,或以蒸馏水为空白,试剂工作液在340nm处吸光度小于1.0,请勿使用。

校准:
使用生理盐水(蒸馏水)和理论K因素进行校准,或者使用生理盐水(蒸馏水)和其它质量可靠的校准血清进行二点校准。

质控:
至少2个浓度水平的质控品。

操作程序:
魅力1800开机
装载试剂
输入参数
实施校准
加载样本
和仪器有关的操作程序请参照魅力1800用户手册。

计算:
无需手工计算,在37℃每个样本的结果自动以U/L打印。

报告结果:
参考范围:
血清和血浆:8~40U/L(37℃)。

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序:
根据仪器参数的正常值会打印异常标志。

报告格式:
自动地打印37℃U/L的报告,如果以SI单位(uKat/L)报告结果,要乘以0.017。

操作过程注意事项:
操作过程的限制性:
丙氨酸氨基转移酶试剂盒的线性范围是0~1000U/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在魅力1800中应用自动重做功能,标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数,魅力1800可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献:
1. Expert Panel on Enzyme . Scientific Committee.International Federation of Clinical Chemistry:IFCC Methods for alanine aminotransferase(stage 2,Draft 1979-11-19). Clin . Chem .Acta. 147F-172F(1980).
2. 叶应妩,王毓三;全国临床检验操作规程(第三版)
Young,D.S.,Effects of Drugs on Clincial Laboratory Tests,4th Edition,AACC Press,1995.
SOP标准操作程序
AST/GOT 天门冬氨酸氨基转移酶(紫外-苹果酸脱氢酶法)试剂盒

临床意义:
本试剂盒适用于体外临床检验,用于测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶的活力。

天门冬氨酸氨基转移酶在心肌细胞内含量较多,当心肌梗塞时,血清中天门冬氨酸氨基转移酶活力增高,48小时内达到高峰。约在3-5天内恢复正常。各种肝病也可引起血清天门冬氨酸氨基转移酶升高,中毒性肝炎可更高。肌炎,胸膜炎,肾炎及肺炎等也可引起其轻度升高。

方法原理:
紫外—苹果酸脱氢酶法(UV-MDH)1~5
AST
L-天门冬氨酸+ α-酮戊二酸 ------→ 草酰乙酸+L-谷氨酸
MDH
草酰乙酸+NADH + H+--------→L-苹果酸+ NAD++ α-酮戊二酸

底物L-天门冬氨酸与α-酮戊二酸在天门冬氨酸氨基转移酶(AST)作用下生成草酰乙酸,生成的草酰乙酸在苹果酸脱氢酶(MDH)作用下转化成L-苹果酸,同时伴随着NADH的氧化,引起在波长340 nm处吸光度下降,下降速率与血清中AST活力成正比。

样本:
样本类型:新鲜无溶血现象的血清或EDTA抗凝血浆。

最少样品量:0.2ml。

样本稳定性:血清中的AST在2~8℃可稳定7天。

仪器与试剂:
仪器:魅力1800生化分析仪
试剂:上海科华生物工程股份有限公司的天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒
试剂准备:天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒为即开即用的液体双剂型,无需特殊准备。试验用试管的直径在12~16mm。

试剂组份:
参见试剂盒内说明书。

注意事项:
1.此试剂为体外诊断用。

2.试剂有毒,不要入口,吞下有害,如误服(包括内部接触)应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛,皮肤及粘膜接触,如不慎接触(外部接触)应用大量的水冲洗受损害的部位。:
3.试剂中含有叠氮钠,可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物,如果排向下水道请用大量的水冲洗。

性能参数:
1.精密度(重复性):
批内变异系数 CV≤5%;
批间相对极差 ≤6%。

2.准确度:
相对偏差≤15%。

3.病人结果可报告范围(线性范围):
0~1000U/L(37℃)。

4.分析特异性(抗干扰能力):
本液体试剂按IFCC推荐法为基础设计,采用二步法,可防止胆红素的干扰,可防止胆红素的干扰。

5.稳定性:
试剂在2~8℃避光保存,有效期为1年;
试剂开启后在2~8℃避光保存,可稳定30天。

变质指示:
如试剂混浊,或以蒸馏水为空白,试剂工作液在340nm处吸光度小于1.0,请勿使用。

校准:
使用生理盐水(蒸馏水)和理论K因素进行校准,或者使用生理盐水(蒸馏水)和其它质量可靠的校准血清进行二点校准。

质控:
至少2个浓度水平的质控品。

操作程序:
魅力1800开机
装载试剂
输入参数
实施校准
加载样本
和仪器有关的操作程序请参照魅力1800用户手册。

计算:
无需手工计算,在37℃每个样本的结果自动以U/L打印。

报告结果:
参考范围:
血清和血浆:5~40U/L(37℃);3~24U/L(30℃);
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应