D B 12天津市地 方标准生活饮用水中5 种人工合成甜味剂的测定液相色谱-串联质谱法2018-0 7- 0 8实施本标准起草单位：天津市疾病预防控制中心。本标准规定了液相色谱-牢联质谱法测定生活饮用水中5种人工合成甜味剂（安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖）含量的原理、测定方法、检出限、准确度和精密度。下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682分析实验用水规格和试验方法。生活饮用水中安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖经过固相萃取浓缩后，经反相色谱柱分离，电喷雾离子源离子化，多反应离子监测（MRM) 检测，外标法定量。4 . 1 除非另有说明，本方法使用的试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.2 安赛蜜标准品：纯度彡99%,基本信息参见附录A。4.3 糖精钠标准品：纯度彡99%,基本信息参见附录A。4 . 4 甜蜜素标准品：纯度彡99%,基本信息参见附录 A。4.5 阿斯巴甜标准品：纯度> 99%,基本信息参见附录A。4.6 三氯蔗糖标准品：纯度> 99%,基本信息参见附录A。4.7 甲 醇 （CH30H) :色谱纯。4.8 乙 腈 （CH3CN) :色谱纯。4.9 三羟甲基氨基甲烷-盐酸（ Tris) 。4 . 1 1乙酸铵：优级纯。4 . 1 2 甲醇 -水（1: 1) : 量取100mL甲醇，加入100mL 水，混勻备用。4. 1 3 标准储备液：称 取5种人工合成甜味剂标准品10.Omg(精确至0. OOOlg) , 置于10mL容量瓶中加甲 醇-水（4.11)定容至刻度，配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液，此溶液_18°C下避光保存，可稳定12个月以上。4. 1 4 混合标准中间液：取4. 12中标准储备液适量，用 甲醇-水（4. 11)配制成10|j g/mL的标准混合液。4°C下避光保存，可稳定3个月以上。4. 1 5 标准工作溶液的配制：吸取适量的4.13中混合标准中间溶液，用甲醇-水（1:1体积比）配制成适当浓度的混合标准工作溶液，使用前配制。4 . 1 6 固相萃取柱：HLB固相萃取柱，6mL,200mg 或相当者。4. 1 7 硝酸纤维膜 ：0.45|jm。6水样的采集与保存打开自来水龙头，放水数分钟后，采集500mL水样于聚丙烯瓶中，用磷酸调pH<2,4°C冰箱保存。水样在测定前放至室温并过0. 45|Jm的硝酸纤维膜。7测定步骤用5mL甲醇与5mL水对HLBM相萃取柱进行活化，将小柱装入N 相萃取装置，使酸化好的样品以4mL/min的速度上样，上样M 为200mL，再以6mL甲醇洗脱，丁i40°C K，用氮吹仪吹至近干，以50%甲醇水定容至lmL，待测。7.2. 1.1 色谱柱：HSS T3,2.ImmXIOOmm, 1.7|Jm 或相当者。7.2. 1 . 2 流动相：A 为乙腈，B 为 10mmol/L 乙酸铵(含2mmol/LTris),梯度洗脱条件见表1。7.2. 1.3流速：0.3mL/min。7.2. 1.4柱温：35°C 。7.2.2. 1电离模式：电喷雾负离子模式（ESI)7.2.2.2毛细管电压：2. 3KV。7.2.2. 5 脱溶剂气流 ：700L/h。7.2.2.6采集方式：多反应监测（ MRM) 。7.2.2.75 种人工合成甜味剂的定性、定量离子见表2。表2五种人工合成甜味剂的定性、定量离子根据试样中被测物的含M选取适宜的标准I:作溶液进行分析。标 准I:作溶液和待测液中甜味剂的响应值均在仪器线性响应范围内。在上述色谱条件下，安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜