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GB_15193_12-2014食品安全国家标准_体外哺乳类细胞HGPRT基因突变试验PDF

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GB标准
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更新时间:2022/3/21(发布于上海)

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文本描述
犌犅15193.12—2014 犎犌犘犚犜 20141224 20150501 犌犅15193.12—2014    GB15193.12—2003《 GB15193.12—2003 “ ; ; (V79/HGPRT) : 》。 ”;    , ——— ——— ——— ——— ——— ———   HGPRT ; ; 。  Ⅰ 犌犅15193.12—2014 犎犌犘犚犜 1  (HGPRT) 。 。 2  2.1 犎犌犘犚犜 。 ,HGPRT X , Xq26.1; 。 X 2.2  , ( ) ( ) 。 3  , HGPRT,6 ( 6thioguanine6TG 5′(NMP),NMPDNA ,) ,HGPRT , 。 () HGPRT, , X HGPRT , 。 6TG 6TG , , , , 。 , 6TG 。 4  4.1  ( ) V79 ( )。 (), CHO ( ) L5178Y 。 TK6 4.2  。 , V79 CHO (,)、 MEMEagle Eagle , ( ) DMEM10% , 。 )20% (96 TK6 ) ( L5178Y RPMI1640 (、 )。 10%  1 犌犅15193.12—2014 4.3  /犈犇犜犃 、PBS 1∶1。-20℃ , 0.05%,EDTA 0.02%, EDTA 。 4.4  。S9 : S9 , 150g~200g 200gL/,500mgkg/ , 5 ~6。 SD Wistar , (Aroclor1254) , , 5d 12h。 ,  β  β , / , , 80mgkg3d16h , 。 。 ( /) 0.15molL , 。 ( ) (/) , 0.1molL3mL 4000r/min,1min~2min) 。 , , ( ( 20000r/min,1min) 。 (0℃~4℃) , 2mL 9000犵10min, , S9 , 。 -80℃ , , (Lowry), , S9 S9 40mg 1。 () , 1%~10%()。 4.5  (), 6TG 5μg/mL~15μg/mL, () 。 0.5% 6 (/) 犜犎犕犌犜犎犌 4.6  , , 24h, THMG THMG , THG( ) 1d~3d 。 ( ): THMG ———,5×10-6molL/; ——— ,5×10-5molL/; ,4×10-7molL/; ——— ——— ,1×10-4molL/。 5  5.1  5.1.1  , 。 。 , 。  2 犌犅15193.12—2014 5.1.2  , , 。 S9 ; , (), DMSO 0.5%。 5.1.3  , ( ) 。 5.1.3.1  , (3methylcholanthrene)、犖 12dimethylbenz[犪]anthracene ) 。 、 , 3 [](, (犖nitrosodimethylamine)、,712 , 犪7 (ethyl methanesulphonate)、 (ethylnitrosourea )。 。 5.1.3.2  ( ) , 。, , 。 5.2  5.2.1  、 。 pH 5.2.2  , , 5.2.3  4 。 。 。 , , ; , 2~槡10 10%~20%( 10%)。 , 5μL/mL、5mg/mL 0.01molL/。 ; , , , S9 ; , 。 5.3  5.3.1  5.3.1.1  5×10 5 100mm , 、 37℃5% 24h。 5.3.1.2  , PBS , 、 ( S9  3