中华人民共和国国家标准 犌犅１９０３．４４—２０２０ 食品安全国家标准 食品营养强化剂　羟钴胺 ２０２００９１１发布２０２１０３１１实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 国家市场监督管理总局发布 犌犅１９０３．４４—２０２０ １ 　 食品安全国家标准 食品营养强化剂　羟钴胺 １　范围 本标准适用于以粘着剑菌（犈狀狊犻犳犲狉犪犱犺犪犲狉犲狀狊）发酵法生产，经提纯、干燥制得的食品营养强化剂 羟钴胺。 ２　分子式、结构式和相对分子质量 ２．１　分子式 Ｃ６２Ｈ８９ＣｏＮ１３Ｏ１５Ｐ ２．２　结构式 ２．３　相对分子质量 １３４６．３８（按２０１８年国际相对原子质量） ３　技术要求 ３．１　感官要求 感官要求应符合表１的规定。 表１　感官要求 项目要求检验方法 色泽深红色 状态晶体或结晶性粉末 取适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，观察其色 泽和状态 犌犅１９０３．４４—２０２０ ２ 　 ３．２　理化指标 理化指标应符合表２的规定。 表２　理化指标 项目指标检验方法 羟钴胺含量（以无水和无溶剂计），狑／％ ９５．０～１０２．０ 附录Ａ．３ 水分，狑／％ １４．０～１８．０ ＧＢ５００９．３ 卡尔·费休法 有关物质（以无水和无溶剂计），狑／％ ≤ ４．０ 附录Ａ．４ 丙酮，狑／％ ≤ ０．５ 附录Ａ．５ ｐＨ（２０ｇ／Ｌ） ８．０～１０．０ 附录Ａ．６ 铅（Ｐｂ）／（ｍｇ／ｋｇ） ≤ ２．０ ＧＢ５００９．７５或ＧＢ５００９．１２ 总砷（以Ａｓ计）／（ｍｇ／ｋｇ） ≤ ２．０ ＧＢ５００９．７６或ＧＢ５００９．１１ 犌犅１９０３．４４—２０２０ ３ 　 附　录　犃 检验方法 犃．１　一般规定 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和ＧＢ／Ｔ６６８２中规定的一级水。试验方法中 所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按ＧＢ／Ｔ６０１、 ＧＢ／Ｔ６０２ 的规定制备。所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。 犃．２　鉴别试验 犃．２．１　试剂和溶液 犃．２．１．１　溴化钾。 犃．２．１．２　焦硫酸钾。 犃．２．１．３　盐酸。 犃．２．１．４　冰醋酸。 犃．２．１．５　乙酸钠。 犃．２．１．６　酚酞指示液：０．１ｇ酚酞用９５％的乙醇溶解并定容到１００ｍＬ。 犃．２．１．７　氢氧化钠溶液：２ｍｏｌ／Ｌ。称取４０ｇ氢氧化钠，用水溶解并定容至５００ｍＬ。 犃．２．１．８　醋酸溶液：１ｍｏｌ／Ｌ。移取５８．８ｍＬ 冰醋酸于１Ｌ 的容量瓶中并用水定容。 犃．２．１．９　１亚硝基２萘酚３，６二磺酸钠溶液：将１ｇ１亚硝基２萘酚３，６二磺酸钠溶于适量水中，转 至１００ｍＬ 容量瓶中并用水定容。 犃．２．２　红外光谱分析 红外光谱分析按ＧＢ／Ｔ６０４０—２００２中５．２．２执行，试样的红外吸收光谱图应与盐酸羟钴胺的标准 谱图一致，盐酸羟钴胺的标准红外光谱图如附录Ｂ的Ｂ．１所示。 犃．２．３　钴离子鉴别 将１ｍｇ羟钴胺和约５０ｍｇ焦硫酸钾放置于坩埚中，在电热板上逐渐加热，直至固体熔融，冷却，用 玻璃棒捣碎，加入３ｍＬ 水，煮沸直至溶解，加１滴酚酞指示液，逐滴滴加氢氧化钠溶液（Ａ．２．１．７）直到粉 红色出现，加入０．５ｇ乙酸钠、０．５ｍＬ 醋酸溶液（Ａ．２．１．８）和０．５ｍＬ１亚硝基２萘酚３，６二磺酸钠溶液 （Ａ．２．１．９），立即呈现红色或橘红色。加入０．５ｍＬ 盐酸，煮沸１ｍｉｎ，红色或橘红色保持不变。 犃．２．４　试样与标准溶液主峰保留时间的比较 在羟钴胺含量项下试验中，试样溶液（Ａ．３．２．９）与标准溶液（Ａ．３．２．８）的主峰保留时间应一致。 犃．３　羟钴胺含量（以无水和无溶剂计）测定 犃．３．１　方法提要 用高效液相色谱法，在选定的工作条件下，通过色谱柱使样品分离，用紫外吸收检测器或二极管阵 犌犅１９０３．４４—２０２０ ４ 　 列检测器检测，用外标法定量，计算样品中羟钴胺的含量。 犃．３．２　试剂和溶液 犃．３．２．１　甲醇：色谱纯。 犃．３．２．２　磷酸。 犃．３．２．３　磷酸二氢钠。 犃．３．２．４　盐酸羟钴胺标准品：ＣＡＳ号为５９４６１３０２，质量分数大于９５％。 犃．３．２．５　磷酸溶液：取１ｍＬ 磷酸于１００ｍＬ 容量瓶中，加水定容至刻度。 犃．３．２．６　缓冲液：称取１５．６ｇ磷酸二氢钠，溶于水，并定容至１０００ｍＬ，用磷酸溶液（Ａ．３．２．５）调ｐＨ 至 ３．０。 犃．３．２．７　稀释液：将甲醇、缓冲液（Ａ．。。。。。。以下内容略