目录 缩略语表 ..............................................2 中文摘要 ..............................................4 ABSTRACT ..............................................6 前 言 ..............................................8 正 文 .............................................14 第一部分 小鼠肺纤维化模型的制备 .....................14 实验材料 ......................................14 实验方法 ......................................17 结果 ..........................................20 讨 论 ........................................25 结论 ..........................................26 第二部分 细胞输注对百草枯诱导小鼠肺纤维化的影响......27 实验材料 ......................................27 实验方法 ......................................28 结果 ..........................................30 讨 论 ........................................37 结论 ..........................................40 参考文献 .............................................41 附录 .................................................47 致谢 .................................................48 综述 .................................................492 缩略语表 缩略词 英文全称 中文全称 PQ Paraquat 百草枯 NADPH triphosphopyridine nucleotide 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 AECⅠ type I alveolar epithelial cells 肺泡Ⅰ型上皮细胞 AECⅡ typeⅡalveolar epithelial cells 肺泡Ⅱ型上皮细胞 7AAD 7-Amino-Actinomycin D 7 氨基放线菌素 D cfus colony forming units 集落形成单位 BLM Bleomycin 博来霉素 BMSCs Bone marrow-derived mesenchymal stem cells 骨髓间充质干细胞 UC-MSCs umbilical cord mesenchymal stem cells 脐带间充质干细胞 EGF epidermal growth factor 表皮生长因子 FGF-10 fibroblast growth factor -10 成纤维细胞生长因子 10 HGF hepatic growth factor 肝细胞生长因子 EC endotheliocyte 内皮细胞 TGFβ-1 transforming growth factor β-1 转化生长因子β-1 KGF keratinocyte growth factor 角质细胞生长因子 BSA bovine serum albumin 牛血清白蛋白 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液3 EMT epithelial-Mesenchymal transition 上皮间质细胞转化 Id2 inhibitor of differentiation 2 分化抑制因子 2 PUFA polyunsa turated fatty acid 多不饱和脂肪酸 SOD superoxide dismutase 超氧化物歧化酶 GSH glutathione 谷胱甘肽 ES embryonic stem cell 胚胎干细胞 LD50 median lethal dose 半数致死剂量4 细胞输注治疗百草枯中毒性肺纤维化的可行性研究 摘要 目的，通过腹腔注射百草枯构建小鼠肺纤维化模型；探讨肺组织细胞亚群输注对 百草枯诱导肺纤维化的影响及可能机制。 方法，一、腹腔注射不同浓度百草枯制备小鼠肺纤维化病理模型，筛选出最佳造 模剂量 1、 动物分组，正常雌性 C57BL/6 小鼠 60 只，随机分为 6 组，10 只/组， 分别为正常对照组，百草枯给药 30mg/kg 组，40mg/kg 组，50mg/kg 组，60mg/kg 组和 80mg/kg 组；2、模型制备，各染毒组予一次性腹腔注射不同浓度百草枯溶液， 正常对照组予腹腔注射等容积无菌生理盐水；3、观察指标，染毒后 28 内各组小鼠 精神状态、存活情况、体重及肺组织病理改变，并计算其半数致死剂量（LD50 值） 及各组肺纤维化 Ashcroft 评分。二、探讨肺组织细胞亚群输注对百草枯诱导小鼠 肺纤维化的影响及可能机制 1、动物分组: 正常雌性 C57BL/6 小鼠 90 只，随机分 为 6 组，分别为正常对照组、百草枯 50mg/kg 模型组、全肺细胞输注组、上皮细 胞输注组、间质细胞输注组；2、模型制备及肺组织细胞亚群流式分选，模型组及 细胞治疗组予一次性腹腔注射百草枯溶液（50mg/kg），给药后 24h 各细胞输注组 予尾静脉输注正常小鼠各肺组织细胞亚群（流式细胞仪分选），正常对照组予腹腔 注射等容积生理盐水，24h 后予尾静脉输注等容积无菌生理盐水；3、观察指标， 细胞输注后 28 内各组小鼠精神状态、存活情况及肺组织病理变化（HE、Masson 染 色），并根据 HE 染色结果进行肺纤维化 Ashcroft 评级。 结果，一、百草枯中毒致肺纤维化造模剂量筛选，至观察期 28 天，小鼠一次性腹 腔注射百草枯溶液的 LD50 为 55.19mg/kg；各染毒组均出现不同程度的肺纤维化改 变，差异有统计学意义（P<0.05），且剂量越高，肺纤维化病变越严重，但早期死 亡率亦越高。二、研究不同肺组织细胞亚群输注对百草枯诱导小鼠肺纤维化的影 响，至观察期 28 天，模型组及各肺细胞输注组较正常对照组相比均出现不同程度 肺损伤改变，差异有统计学意义（P<0.05）;全肺细胞输注组、上皮细胞输注组、5 间质细胞输注组其肺组织病理改变较模型组相比均有改善，差异有统计学意义 （P<0.05），各细胞群治疗组之间肺病理改变无显著性差异（P>0.05）。 结论，40mg/kg 和 50mg/kg 均为较合适的造模剂量，研究者可根据不同的研究目的 选择相应的染毒剂量；肺组织全肺细胞、上皮细胞、间质细胞输注可减轻或延缓 百草枯诱导的小鼠肺纤维化，尤其是特定的单一肺组织细胞亚群输注亦能发挥其 修复效应。 关键词，肺纤维化 百草枯 肺组织细胞亚群