附件1 宫炎康颗粒中金胺 O检查项补充检验方法（BJY 201801）【检查】金胺 O（1）取本品 9g，研细，加 0.1%甲酸甲醇溶液 50ml，密塞，超声处理 30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 2ml 使溶解，作为供试品溶液。取金胺O对照试剂适量，加甲醇制成每 1ml含 0.3mg的溶液，作为对照试剂溶液。照薄层色谱法（中国药典 2015 年版通则 0502）试验，取供试品溶液 5μl、对照试剂溶液 2μl，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-氨水（4：5：1：1）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视。供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。（2）照高效液相色谱法（中国药典 2015年版通则 0512）测定。色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相 A，0.05mol/L 醋酸铵溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为 432nm。理论塔板数按金胺 O 对照试剂色谱中的主峰计算，不应低于 2000。—1——时间（min）流动相 A（%）流动相B(%) 0～12 10→4545→7070→8090→5555→3030→2012～20 20～40 对照试剂溶液的制备取金胺 O对照试剂适量，加甲醇制成每 1ml 含 8μg的溶液，即得。供试品溶液的制备取上述（1）项下的供试品溶液，上清液用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液，立即进样。测定法取上述供试品溶液和对照试剂溶液各 10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果判断供试品色谱中，在与金胺 O对照试剂色谱保留时间相应的位置不得出现相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在 320～450nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。备注：必要时，可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。建议使用乙腈－0.1%甲酸（30:70）流动相系统。起草单位：黑龙江省食品药品检验检测所复核单位：河南省食品药品检验所、陕西省食品药品检验所——2—