文本描述
版权所有·禁止翻制、电子发售 中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准 犛犖／犜２７９８ —２０１１ 进 出 口 蜂 王 浆 中 苯 酚 残 留 量 的 测 定 方 法 高 效 液 相 色 谱 法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀 狅犳狆犺犲狀狅犾狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀 狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱 犲狓狆狅狉狋— 犎犻犵犺 狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔 犿犲狋犺狅犱 ２０１１０２２５ 发 布 ２０１１０７０１ 实 施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 犛犖／犜２７９８ —２０１１ 版权所有·禁止翻制、电子发售 前 言 本 标 准 按 照 ＧＢ／Ｔ１．１—２００９ 给 出 的 规 则 起 草 。 本 标 准 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。 本 标 准 起 草 单 位 ：中 华 人 民 共 和 国 浙 江 出入 境 检 验 检 疫 局。 本 标 准 主 要 起 草 人 ：黄 超 群 、谢 文 、陈笑 梅 、刘 海 山 、史 颖 珠。 Ⅰ 犛犖／犜２７９８ —２０１１ 版权所有·禁止翻制、电子发售 进 出 口 蜂 王 浆 中 苯 酚 残 留 量 的 测 定 方 法 高 效 液 相 色 谱 法 １ 范 围 本 标 准 规 定 了 蜂 王 浆 中 苯 酚 残 留 量 液 相 色 谱测 定 方 法。 本 标 准 适 用 于 蜂 王 浆 中 苯 酚 残 留 量 的 测 定。 ２ 方 法 提 要 样 品 用 甲 醇 沉 淀 蛋 白 质 后 ，上 层 清 液经 ＨＬＢ固 相 萃 取柱 净 化 。 用 配 有 荧 光 检 测器 的 高 效 液 相 色 谱 仪 测 定 ，外 标 法 定 量。 ３ 试 剂 和 材 料 除 另 有 规 定 外 ，试 剂 均 为 分 析 纯 ，水 为超 纯 水。 ３．１ 甲 醇 ：液 相 色 谱 纯。 ３．２ 乙 腈 ：液 相 色 谱 纯。 ３．３ 甲 醇水（１５ ＋８５ ，体 积 比）。 ３．４ 甲 醇水（１＋１，体 积 比）。 ３．５ 苯 酚 标 准 物 质 （Ｐｈｅｎｏｌ ，ＣＡＳ编 号 １０８９５２ ，Ｃ ６Ｈ６Ｏ ）：纯 度 大 于 等 于 ９９ ％。 ３．６ 苯 酚 标 准 储 备 液 ：准 确 称 取适 量 的 苯 酚 标 准 物 质 （３．５），用甲 醇（３．１）配制 成 浓 度 为 ０．１０ｍｇ／ｍＬ 的 标 准 储 备 液 ，－１８℃ 保 存 。 有 效 期 为 ６ 个 月。 ３．７ 苯 酚 标 准 工 作 液 ：根 据 需 要用 甲 醇 ＋ 水 （３．４）溶液 稀 释 成 适 当 浓 度 的 标 准工 作 溶 液 ，０ ℃ ～ ４ ℃保 存 。 有 效 期 为 ３ 个 月。 ３．８ ＨＬＢ固 相 萃 取 柱 （或相 当 者 ）：５００ ｍｇ，６ｍＬ。 使 用 前 用 ５ ｍＬ 湿 润。 甲 醇 １０ ｍＬ 水 预 洗 并 保持 柱 体 ４ 仪 器 和 设 备 ４．１ 高 效 液 相 色 谱 仪 ，配 有 荧 光检 测 器。 ４．２ 固 相 萃 取 仪。 ４．３ 高 速 离 心 机 ：９ ０００犵。 ４．４ 振 荡 器。 ５ 试 样 制 备 和 保 存 取 ５００ ｇ 代 表 性 蜂 王 浆 样 品 ，在 室 温 下 解 冻 ，等样 品 全 部 融 化 后 搅 匀 ，将 试 样 均 分 成 两 份 ，分 别装 入 样 品 瓶 中 ，密 封 ，并 标 明 标 记 。 一 份 作 为 试验 样 ，另 一 份 在 － １８ ℃ 保 存 。 在 制样 的 操 作 过 程 中 ，应 防 止 样 品 污 染 或 发 生 残 留 物 含 量 的 变 化。 １ 犛犖／犜２７９８ —２０１１ 版权所有·禁止翻制、电子发售 ６ 测 定 步 骤 ６．１ 提 取 称 取 试 样 ４ ｇ（精确 至 ０．０１ ｇ），置于 ５０ ｍＬ离 心 管 中 ，加入 １０ ｍＬ水 ，振 荡 ２ ｍｉｎ，再加 入 甲 醇至 ２０．０ｍＬ，混匀 ，离 心 （９ ０００犵 ）５ ｍｉｎ。 移 取 上 层 清 液 １０．０ ｍＬ至 ５０ ｍＬ 离 心 管 中 ，加 水 至 ３０ ｍＬ，待净 化。 ６．２ 净 化 将 上 述 提 取 液 过 预 先 淋 洗 好 的ＨＬＢ固 相 萃 取 柱 ，再 用 ５ ｍＬ １５ ％ 甲 醇水（１５ ＋ ８５ ，体 积 比 ）溶 液 淋 洗 ，在 真 空 负 压 下 ，减 压 抽 干 ，弃 去 全部 淋 出 液 。 用 ４ ｍＬ 甲 醇以 １ ｍＬ／ｍｉｎ的 流 速 洗 脱 ，收集 全 部 洗 脱 液 ，摇 匀 后 加 入 １．０ｍＬ 水 ，混匀 ，氮 吹 至 １ ｍＬ ～２ｍＬ ，用 甲 醇 定 容 至 ２．０ｍＬ ，０．４５ μｍ滤 膜 过 滤 ，供 液 相 色 谱 测 定。 ６．３ 测 定 ６．３．１ 液 相 色 谱 条 件 ６．３．１．１ 色 谱 柱 ：Ｃ１８ 柱 ，５ μｍ ，２５０ ×４．６ｍ ｍ （内 径 ）或 相 当 者。 ６．３．１．２ 流 动 相 ：乙 腈 ＋水 （３０ ＋７０ ，体 积 比）。 ６．３．１．３ 流 速 ：１．０ｍＬ／ｍｉｎ。 ６．３．１．４ 检 测 波 长 ：激 发波 长 ２７０ ｎｍ ，发 射 波 长 ２９５ ｎｍ。 ６．３．１．５ 进 样 量 ：１００ μＬ。 ６．３．２ 色 谱 测 定 根 据 试 样 溶 液 中 苯 酚 含 量 情 况 ，选 定 峰 面积 相 近 的 苯 酚 标 准 工 作 溶 液 。 标 准 工作 溶 液 和 试 样 溶 液 中 苯 酚 的 响 应 值 均 应 在 仪 器 测 定 的 线性 范 围 内 。 对 标 准 工 作 溶液 和 试 样 溶 液 等 体 积 参插 进 样 进 行 测 定 。 在 上 述 色 谱 条 件 下 ，苯 酚 的 参 考 保 留 时 间为
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