ICS67.120.30 B 50 DB34 安徽省地方标准 DB 34/T 2252—2014 水产品中孔雀石绿残留的检测—胶体金免 疫层析法 Detection of malachite green residue in aquatic products- Colloidal gold immunochromatographic method 2014-12-17发布 2015-01-17实施 安徽省质量技术监督局发 布   DB34/T 2252—2014 前言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由合肥市渔政监督管理站提出。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：合肥市畜牧水产技术推广中心、合肥市渔业协会、杭州南开日新生物技术有限公 司。 本标准起草人：赖年悦、孙德祥、桑丽雅、周作友、徐薇、陈友顺、杨锐、曹海、张军、夏俊华、 陈元生、程定文、方凯、钱继银、桂淦、胡积清、戴靖、陈晓荣、徐丽、沈亭海、徐经云、洪家春。 I   DB34/T 2252—2014 水产品中孔雀石绿残留的检测-胶体金免疫层析法 1范围 本标准规定了水产品中孔雀石绿（MalachiteGreen，MG）及其代谢物隐色孔雀石绿（Leucomalachite Green，LMG）残留的检测——胶体金免疫层析法的原理、试剂和材料、仪器和设备、测定步骤、结果判 断及表述、结果确证的方法。 本标准适用于鱼、甲鱼、龟肌肉组织和虾、蟹去壳、肠腺的可食用组织中孔雀石绿及其代谢物隐色 孔雀石绿残留的快速筛查检测。 本标准方法的检出限为：3.0μg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 本法为竞争抑制法，将氯金酸用还原法制成一定直径的金溶胶颗粒，标记抗体。样品中残留的孔雀 石绿及其代谢物隐色孔雀石绿，以乙酸胺盐溶液和乙腈提取，正己烷净化，经四氯苯醌将隐色孔雀石绿 氧化成孔雀石绿，转入并溶解金标微孔内包被的抗孔雀石绿抗体和胶体金的结合物，再滴加到孔雀石绿 胶体金免疫快速检测试剂板的加样孔中，样品溶液以硝酸纤维素（NC）膜为载体，利用微孔膜的毛细管 作用缓慢向另一端渗移，在移动的过程中，样品溶液中的孔雀石绿与胶体金标记的特异性单克隆抗体结 合，从而抑制了抗体和检测线上特异性结合抗原的结合，未被孔雀石绿结合的抗体与检测线上的抗原反 应，并通过胶体金的颜色而显示出红色条带。用胶体金读卡仪或目测比较板/卡上控制线（C 线）和检 测线（T 线）上红色条带的有无及颜色的相对深浅进行判定。当样品中的孔雀石绿或隐色孔雀石绿含量 达到或超过本方法检出限时，检测线较控制线显色淡甚至无显色，判定为阳性。反之，当样品中的孔雀 石绿或隐色孔雀石绿含量在本方法检出限以下或无残留时，检测线与控制线显色一致或偏深，判定为阴 性。 4试剂和材料 4.1除特殊注明外，本法所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682 规定的二级水。 4.2对甲苯磺酸（C7H8O3S）。 4.3盐酸羟胺（ClH4NO）。 4.4乙酸铵（C2H7NO2）。 4.5乙腈（C2H3N）。 4.6中性氧化铝（Al2O3）：其悬浮液的pH为7.5，层析用，100目～200目。 1