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ICS65.020.20B 05DB22备案号:54204-2017吉林省地方标准DB22/T 2527—2016转基因玉米中cry1A基因定性检测 PCR法Qualitative detection for cry1A genes in genetically modified maize —PCR method2016-12-09发布2017-03-01实施吉林省质量技术监督局发 布 DB22/T 2527—2016前言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 和 GB/T 20001.4-2015 给出的规则起草。本标准由吉林省农业委员会提出并归口。本标准起草单位:吉林省农业科学院。本标准主要起草人:李飞武、邵改革、夏蔚、闫伟、董立明、李葱葱。I DB22/T 2527—2016转基因玉米中 cry1A 基因定性检测PCR 法 1范围本标准规定了转基因玉米中 cry1A 基因定性检测 PCR 法的术语和定义、原理、试剂或材料、试验条件、仪器设备、样品、试验步骤、结果分析与表述、检出限。本标准适用于转基因玉米 MON810、MON89034、Bt11、Bt176、Bt506、C0030.3.5、双抗12-5 转化体及其衍生品种的植株、籽粒及以玉米为唯一原料的玉米初加工品中的 cry1A 基因的普通 PCR 定性检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法NY/T 672转基因植物及其产品检测通用要求农业部 1485 号公告—4—2010转基因植物及其产品成分检测DNA 提取和纯化农业部 1861 号公告—3—2012转基因植物及其产品成分检测玉米内标准基因定性 PCR 方法农业部 2031 号公告—19—2013转基因植物及其产品成分检测抽样3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1zSSIIb 基因zSSIIb gene编码玉米淀粉合酶异构体 zSTSII-2 的基因,在本标准中作为玉米的内标准基因。3.2cry1A 基因cry1A gene编码苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis) Cry1A 杀虫晶体蛋白的一类基因。4原理根据转基因玉米中 cry1A 基因保守序列设计特异性引物,对试样进行 PCR 扩增。依据是否扩增获得预期 330 bp 的 DNA 片段,判断样品中是否含有 cry1A 基因成分。5试验条件常温条件下。1