文本描述
中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准犛犖／犜２５２５ —２０１０食 品 中 肉 毒 梭 菌 的 犘犆犚 检 测 方 法犇犲狋犲犮狋犻狅狀 狅犳犆犾狅狊狋狉犻犱犻狌犿 犫狅狋狌犾犻狀狌犿犻狀 犳狅狅犱狊 犫狔 犘犆犚２０１００３０２ 发 布２０１００９１６ 实 施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 犛犖／犜２５２５ —２０１０前 言 本 标 准 参 照 美 国 ＦＤＡＢＡＭ 第 １７ 章 第 ５ 部 分 ：Ａ 、Ｂ 、Ｅ 、Ｆ 型 肉 毒 梭 菌 ＰＣＲ检 测 方 法［Ｕ ．Ｓ．ＦＤＡ ，Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｍａｎｕａｌ Ｏｎｌｉｎｅ，Ｃｈａｐｔｅｒ１７ （Ｖ ），２００１ ：Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍＴｙｐｅｓ Ａ ，Ｂ ，Ｅ ａｎｄ Ｆ ＵｓｉｎｇｔｈｅＰｏｌｙｍｅｒａｓｅ ＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）．］经 研 究 和 验 证 后 制 定。本 标 准 的 附 录 Ａ 、附 录 Ｂ均 为 规 范 性 附 录。本 标 准 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。本 标 准 起 草 单 位 ：中 华 人 民 共 和 国 厦 门 出入 境 检 验 检 疫 局。本 标 准 主 要 起 草 人 ：陈 双 雅 、谢 明 星 、张永 祥 、陈 伟 玲 、王 群 力 、刘 棠 、彭 小 莉 、周 赞 虎 、张孟 璋。本 标 准 系 首 次 发 布 的 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标准。Ⅰ 犛犖／犜２５２５ —２０１０食 品 中 肉 毒 梭 菌 的 犘犆犚检 测 方 法１ 范 围本 标 准 规 定 了 食 品 中 肉 毒 梭 菌 的 ＰＣＲ检测 方 法。本 标 准 适 用 于 食 品 中 Ａ 、Ｂ 、Ｅ 、Ｆ 型 肉 毒 梭 菌 的 检 测。２ 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 条 款 通 过 本 标 准 的 引 用 而 成 为本 标 准 的 条 款 。 凡 是 注 日 期 的 引 用文 件 ，其 随 后 所 有的 修 改 单 （不 包 括 勘 误 的 内 容 ）或 修 订版 均 不 适 用 于 本 标 准 ，然 而 ，鼓 励 根 据 本 标 准 达 成 协 议 的 各 方 研 究是 否 可 使 用 这 些 文 件 的 最 新 版 本 。 凡 是 不 注 日 期的 引 用 文 件 ，其 最 新 版 本 适 用 于 本 标 准。ＧＢ／Ｔ４７８９ ．１２ 食 品 卫 生 微 生 物 学检 验 肉 毒 梭 菌 及 肉 毒 毒 素 检 验ＧＢ／Ｔ６６８２ 分 析 试 验 室 用 水 规 格 和 实 验 方 法ＧＢ １９４８９ 实 验 室 生 物 安 全 通用 要 求ＧＢ／Ｔ２７４０３ 实 验 室 质 量 控 制 规 范 食 品 分 子 生 物 学 检 测ＳＮ／Ｔ１１９３ 基 因 检 验 实 验 室 技 术 要 求３ 术 语 、定 义 和 缩 略 语下 列 术 语 、定 义 和 缩 略 语 适 用 于 本 标 准。３．１ 术 语 和 定 义３．１．１ 肉 毒 梭 菌 犆犾狅狊狋狉犻犱犻狌犿犫狅狋狌犾犻狀狌犿肉 毒 梭 菌 为 梭 菌 科 梭 菌 属 革 兰 氏 阳 性 芽 孢 杆菌 ，厌 氧 ，在 适 宜 的 培 养 基 及 特 定 的 环 境 条 件 下 产 生 一类 具 有 很 强 毒 性 的 神 经 麻 痹 毒 素 ，即 肉 毒毒 素。３．１．２ 聚 合 酶 链 式 反 应 狆狅犾狔犿犲狉犪狊犲犮犺犪犻狀狉犲犪犮狋犻狅狀，犘犆犚模 板 ＤＮ Ａ先 经 高 温 变 性 成 为 单 链 ，在 ＤＮ Ａ聚 合 酶 作 用 和 适 宜 的 反 应 条件 下 ，根 据 模 板 序 列 设 计的 两 条 引 物 分 别 与 模 板 ＤＮＡ 两 条 链 上 相 应 的 一 段 互 补 序 列 发 生 退 火 而 相 互 结合 ，接 着 在 ＤＮ Ａ 聚 合 酶的 作 用 下 以 四 种 脱 氧 核 糖 核 酸 （ｄＮＴＰ）为底 物 ，使 退 火 引 物 得 以 延 伸，然 后 不 断 重 复 变 性 、退火 和 延 伸这 一 循 环 ，使 位 于 两 段 已 知 序 列 之 间 的ＤＮ Ａ 片 段 呈 几 何 倍 数 扩 增。３．２ 缩 略 语３．２．１ 犫狆 犫犪狊犲 狆犪犻狉碱 基 对。３．２．２ 犇犖犃 犱犲狅狓狔狉犻犫狅狀狌犮犾犲犻犮 犪犮犻犱脱 氧 核 糖 核 酸。３．２．３ 犱犖犜犘 犱犲狅狓狔狉犻犫狅狀狌犮犾犲狅狊犻犱犲狋狉犻狆犺狅狊狆犺犪狋犲脱 氧 核 苷 三 磷 酸。１ 犛犖／犜２５２５ —２０１０３．２．４ 犱犃犜犘 犱犲狅狓狔犪犱犲狀狅狊犻狀犲 狋狉犻狆犺狅狊狆犺犪狋犲脱 氧 腺 苷 三 磷 酸。３．２．５ 犱犆犜犘 犱犲狅狓狔犮狔狋犻犱犻狀犲狋狉犻狆犺狅狊狆犺犪狋犲脱 氧 胞 苷 三 磷 酸。３．２．６ 犱犌犜犘 犱犲狅狓狔犵狌犪狀狅狊犻狀犲 狋狉犻狆犺狅狊狆犺犪狋犲脱 氧 鸟 苷 三 磷 酸。３．２．７ 犱犜犜犘 犱犲狅狓狔狋犺狔犿犻犱犻狀犲狋狉犻狆犺狅狊狆犺犪狋犲脱 氧 胸 苷 三 磷 酸。３．２．８ 犜犪狇 犜犺犲狉犿狌狊犪狇狌犪狋犻犮狌水 生 栖 热 菌。３．２．９ 犜狉犻狊 狋狉犻狊 （犺狔犱狉狅狓狔 犿犲狋犺狔犾）犪犿犻狀狅犿犲狋犺犪狀犲三 （羟 甲 基 ）氨 基 甲 烷。３．２．１０ 犈犇犜犃 犲狋犺狔犾犲狀犲 犱犻犪犿犻狀犲狋犲狋狉犪犪犮犲狋犻犮 犪犮犻犱乙 二 胺 四 乙 酸。４ 生 物 安 全 措 施为 了 保 护 实 验 室 人 员 的 安 全 ，应 由 具 备 资格 的 工 作 人 员 检 测 肉 毒 梭 菌 ，所 有 培 养
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