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SNT_2497_24-2010进出口危险化学品安全试验方法第24部分:细胞免疫功能体外检测方法PDF

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进出口 SNT 危险化学
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文本描述
中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准犛犖/犜2497 .24 —2010进 出 口 危 险 化 学 品 安 全 试 验 方 法第 24 部 分 :细 胞 免 疫 功 能 体 外 检 测 方 法犜犲狊狋 犿犲狋犺狅犱 狅犳犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋 犱犪狀犵犲狉狅狌狊 犮犺犲犿犻犮犪犾狊—犘犪狉狋24 :犞犻狋狉狅狋犲狊狋狅犳犮犲犾犾犻犿 犿狌狀狅犾狅犵犻犮犳狌狀犮狋犻狅狀20100302 发 布20100916 实 施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 犛犖/犜2497 .24 —2010前    言    SN/T2497 《进 出 口 危 险 化 学 品 安 全 试 验 方 法 》系 列 标 准 共 分 为 29 部 分 :——— 第 1 部 分 :体 内 哺 乳 动 物 肝 细 胞程 序 外——— 第 2 部 分 :空 斑 形 成 细 胞 (PFC)试 验;——— 第 3 部 分 :大 型 溞 繁 殖 试 验;合 成 (UDS)试 验;DN A——— 第 4 部 分 :酿 酒 酵 母 有 丝 分 裂 重组 试 验;——— 第 5 部 分 :睾 丸 细 胞UDS试 验;——— 第 6 部 分 :哺 乳 类 动 物 细 胞 姐 妹染 色 单 体 互 换 体 外 试 验;——— 第 7 部 分 :小 鼠 耳 肿 胀 试 验;——— 第 8 部 分 :腘 窝 淋 巴 结 试 验;——— 第 9 部 分 :血 清 溶 血 素 测 定 试 验 ;——— 第 10 部 分 :T 淋 巴细 胞 增 殖 功 能 测 定 试 验;——— 第 11 部 分 :种 系 突 变 试 验 ;——— 第 12 部 分 :单 细 胞 凝 胶 电泳 分 析 试 验;——— 第 13 部 分 :荧 光 原 位 杂 交试 验;——— 第 14 部 分 :SDS聚丙 烯 酰胺 凝 胶 电 泳 试 验;——— 第 15 部 分 :PCRSSCP 实 验;——— 第 16 部 分 :WesternBlot实 验;——— 第 17 部 分 :哺 乳 动 物 行 为毒 理 学 试 验;——— 第 18 部 分 :DN A加 合 物 的 检 测 方 法;——— 第 19 部 分 :NorthernBlot 实 验;——— 第 20 部 分 :Bradford法 测 定 蛋 白 质 含 量;——— 第 21 部 分 :琼 脂 糖 凝 胶 电泳 试 验;——— 第 22 部 分 :DN A的值 测 定 方 法;Tm——— 第 23 部 分 :细 胞 器 的 分 离实 验 方 法;——— 第 24 部 分 :细 胞 免 疫 功 能体 外 检 测 方 法;——— 第 25 部 分 :体 液 免 疫 功 能试 验;——— 第 26 部 分 :巨 噬 细 胞 功 能试 验;——— 第 27 部 分 :流 式 细 胞 术 检测 凋 亡;——— 第 28 部 分 :穿 梭 质 粒 在 突变 检 验 中 的 应 用;——— 第 29 部 分 :生 化 需 氧 量 (BOD)测 定。本 部 分 为 SN/T2497 系 列标 准 的 第 24 部 分。本 部 分 修 改 采 用 《毒 理 学 实 验 方 法 与 技 术 》中的 免 疫 毒 理 学 研 究 方 法 ,其 有关 技 术 内 容 与 上 述 方 法完 全 一 致 ,在 标 准 文 本 格 式 上 按GB/T 1.1做 了 编 辑 性 修 改。本 部 分 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。本 部 分 负 责 起 草 单 位 :中 华 人 民 共 和 国 天津 出 入 境 检 验 检 疫 局 、中 华 人 民 共 和 国 湖 南 出 入 境 检 验 检疫 局。本 部 分 主 要 起 草 人 :吕 刚 、王 利 兵 、冯智 劼 、李 学 洋 、熊 中 强 、赵 好 力 宝。本 部 分 系 首 次 发 布 的 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标准。Ⅰ 犛犖/犜2497 .24 —2010进 出 口 危 险 化 学 品 安 全 试 验 方 法第 24 部 分 :细 胞 免 疫 功 能 体 外 检 测 方 法1 范 围SN/T2497 的 本 部 分 规 定 了 进 出口 危 险 化 学 品 安 全 试 验 中 体 外 细 胞 免 疫 功 能试 验 的 试 验 原 理 、试验 方 法 和 试 验 结 果。本 部 分 适 用 于 检 测 进 出 口 危 险 化 学 品 安 全 性的 细 胞 免 疫 毒 性 的 体 外 检 测 试 验。2 试 验 原 理人 外 周 血 T 淋 巴细 胞 表 面 具 有 绵 羊 红 细 胞 受 体 (E 受 体 ),即 CD2分 子 ,而 B 淋 巴细 胞 表 面 则 没 有。因 而 在 体 外 ,当 将 淋 巴 细 胞 与 绵 羊 红 细 胞混 合 时 ,可 形 成 以 T 淋 巴 细 胞 为中 心 ,周 围 环 绕 绵 羊 红 细 胞 的玫 瑰 花 样 的 花 环 。 该 试 验 可 用 于 检 测 外 周 血 中T 淋 巴 细 胞 的 数 目 与 比 例。3 试 验 方 法3.1 试 剂3.1.1  淋 巴 细 胞 分 离 液 、肝素 、无 钙 、镁 的Hank′s 液 , pH0.2%冷 美 兰。值7.2 ~ 7.6、Alsever溶 液 、0.8%戊 二 醛、3.1.2  绵 羊 红 细 胞用 Alsever 溶 液 保 存 的 新 鲜绵 羊 血 经 洗 涤 后 ,配 制 1% 绵羊 红 细 胞 悬 液。3.1.3  吸 收 灭 活 胎 牛 血 清胎 牛 血 清 经 56 ℃ 30min 灭 活 后 ,按 每 毫 升 胎 牛 血 清 加 入 洗 涤 过 的 压 积 绵 羊 红细 胞 0