ICS11.220B 41DB22备案号：36036-2013吉林省地方标准 DB 22/T 1745—2012 弓形虫聚合酶链式反应（PCR）检测方法 Detection method of polymerase chain reaction of Toxoplasma gondii 2012-12-21发布2013-01-01实施吉林省质量技术监督局发 布 DB22/T 1745-2012前言本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。本标准起草单位：吉林省畜牧兽医科学研究院。本标准主要起草人：姚新华、苑淑贤、任科研、曹利利、杨金生、程荣华。I DB22/T 1745-2012弓形虫聚合酶链式反应（PCR）检测方法1范围本标准规定了聚合酶链式反应（PCR）检测弓形虫的原理、实验材料、仪器设备、试剂、操作程序、结果判定及废弃物处理和防止污染的措施。本标准适用于PCR法检测弓形虫。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法。3原理PCR技术是在模板DNA、引物和4种脱氧核糖核酸存在的条件下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，通过变性、退火、延伸周期性的多次循环，使两个引物之间的特异性DNA片段得到体外扩增。出现1080bp电泳条带为阳性，其它为阴性。4实验材料4.1眼科剪。4.2眼科镊。4.3称量纸。4.4一次性注射器10 mL。4.5无菌离心管1.5 mL。4.6薄壁PCR管0.2mL。4.7琼脂糖。4.8量筒500 mL。4.9锥形瓶500 mL。4.10吸头（10μL、200μL 、1000μL）。4.11灭菌双蒸水。5仪器设备5.1分析天平。5.2PCR扩增仪。5.3台式低温高速离心机。1