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版权所有·禁止翻制、电子发售 中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准 犛犖／犜２８６８ —２０１１ 西 尼 罗 病 毒 病 检 疫 技 术 规 范 犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲 狆狉狅狋狅犮狅犾犳狅狉 狑犲狊狋狀犻犾犲犳犲狏犲狉 ２０１１０５３１ 发 布 ２０１１１２０１ 实 施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 版权所有·禁止翻制、电子发售 犛犖／犜２８６８ —２０１１ 前 言 本 标 准 按 照 ＧＢ／Ｔ１．１—２００９ 给 出 的 规 则 起 草 。 本 标 准 参 考 了 国 际 动 物 卫 生 组 织 （ＯＩＥ ）的 《诊断 试 验 和 疫 苗 标 准 手 册 》（２００８版 ）（ＭａｎｕａｌｏｆＤｉａｇ ｎｏｓｔｉｃ Ｔｅｓｔ ａｎｄ Ｖａｃｃｉｎｅｓｆｏｒ Ｔｅｒｒｅｓｔｒｉａｌ Ａｎｉｍａｌｓ）２．１．２０ 章 和有 关 行 业 标 准 、文 献 制 定 ，补充 了 ＲＴＰＣＲ 和 实 时 荧 光 ＲＴＰＣＲ 的 检 测 方 法。 本 标 准 由 国 家 认 证 认 可 监 督 委 员 会 提 出 并 归口。 本 标 准 起 草 单 位 ：中 华 人 民 共 和 国上 海 出 入 境 检 验 检 疫 局 、中华 人 民 共 和 国 江 苏出 入 境 检 验 检 疫 局 、中 华 人 民 共 和 国 云 南 出 入 境 检 验 检 疫局。 本 标 准 主 要 起 草 人 ：邱 璐 、李 健 、姜焱 、熊 炜 、周 晓 黎 、蒋 静 、胡 永 强。 Ⅰ 版权所有·禁止翻制、电子发售 犛犖／犜２８６８ —２０１１ 西 尼 罗 病 毒 病 检 疫 技 术 规 范 １ 范 围 本 标 准 规 定 了 西 尼 罗 病 毒 病 临 床 诊 断 和 实 验室 诊 断。 本 标 准 适 用 于 西 尼 罗 病 毒 病 病 原 及 抗 体 的 检测。 ２ 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是注 日 期 的 引 用 文 件 ，仅 注 日 期的 版 本 适 用 于 本 文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ，其 最 新 版 本 （包括 所 有 的 修 改 单 ）适 用 于 本 文 件。 ＧＢ／Ｔ６６８２ 分 析 实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法 ３ 临 床 诊 断 ３．１ 发 病 症 状 人 和 马 感 染 后 ，多 数 不 出 现 症 状 ，部 分感 染 者 发 生 伴 有 类 似 流 感 症 状 的 西 尼罗 热 ，少 量 严 重 的 病 例 出 现 高 热 、剧 烈 头 痛 、颈 项 强 直 、昏迷 、抽 搐 等 中 枢 神 经 系 统 体 症 ，发 生 西 尼 罗 脑 炎 ，甚 至 死 亡。 ３．２ 流 行 病 学 西 尼 罗 病 毒 （ｗｅｓｔｎｉｌｅｖｉｒｕｓ，Ｗ Ｎ Ｖ ）为 单 链 ＲＮ Ａ 病 毒 ，属 黄 病 毒 科 黄 病 毒 属 。 病 毒 呈球 形 ，基 因 组 编 码 三 种 结 构 蛋 白 （Ｃ 、ｐｒＭ和 Ｅ 蛋 白 ）与 七 种 非 结 构 蛋白 。 西 尼 罗 病 毒 在 抗 原 性 上 与同 属 黄 病 毒 的 日 本 乙 型 脑 炎 病 毒 、圣 路 易 斯 脑 炎 病 毒 、Ｋｕｎｊｉｎ病 毒 、登 革 病 毒 相 似 ，在 血 清学 检 测 时 ，易 产 生 交 叉 反 应。 西 尼 罗 病 毒 于 １９３７ 年首 次 分 离 ，经 蚊 媒 传 播 可 引 起 人 类 或 动 物 的西 尼 罗 热 及 西 尼 罗 脑 炎 。 鸟 类、 马 、人 等 哺 乳 动 物 都 是 易 感 动 物 。 其 中 鸟 类 是主 要 的 储 存 宿 主。 该 病 在 ２０ 世 纪 ５０ 年 代 ～９０年 代 都 曾 有 过 流 行 ，特别 是 ２０ 世 纪 ９０ 年 代 以 后 ，流 行区 呈 扩 大 趋 势， 范 围 遍 及 非 洲 、欧 洲 、中 东 、西 亚 、中亚 、大 洋 洲 和 北 美 洲 等 广 大 地 区 。 目 前 我 国 尚 无 该 病 流 行 的 报 道 ，但 随 着 全 球 气 候 变 暖 ，疫 源 地 旅 行 传 播 以及 生 物 媒 介 等 潜 在 因 素的 存 在 ，为 西 尼 罗 病 毒的 传 播 提 供 了 可 能 。 加 之 该 病 毒 目 前 在 我 国 周 边 国 家 如 印 度 、俄罗 斯 南 部 、东 南 亚 等 国 已 有 报 道 ，我国 人 群 普 遍 缺 乏 对 该 病 毒 的 免 疫 力 ，一 旦 传 入 ，将 导 致 严重 的 公 共 卫 生 灾 难。 ４ 实 验 室 诊 断 ４．１ 西 尼 罗 病 毒 犚犜犘犆犚、实 时 荧 光犚犜犘犆犚 ４．１．１ 方 法 介 绍 检 测 及 套 式 犘犆犚 检 测 可 以 进 行 西 尼 罗 病 毒 核 酸检 测 。 本 标 准 提 供 的 三种 核 酸 检 测 方 法 可以 根 据 具 体 情 况 选择 采 用。 ＰＣＲ试 验 的 前 处 理 操 作 可 以 在 ＢＳＬ２实 验 室 进 行 。 在 对 人、活 动 物 或 尸 体 进 行 取 样 时，采 样 人 员 应 佩 戴 个 人 防 护 设 施 ，穿 戴 防 护 衣 ，佩 戴 防护 口 罩 、面 罩 、手 套。 １ 版权所有·禁止翻制、电子发售 犛犖／犜２８６８ —２０１１ ４．１．２ 设 备 、材 料 和 试 剂 ４．１．２．１ 设 备 、材 料 ４．１．２．１．１ ＰＣＲ仪。 ４．１．２．１．２ 实 时 荧 光 ＰＣＲ检 测 仪。 ４．１．２．１．３ 电 泳 仪。 ４．１．２．１．４ 凝 胶 成 像 分 析 系 统。 ４．１．２．１．５ 高 速 台 式 冷 冻 离 心 机。 ４．１．２．１．６ 普 通 台 式 离 心 机。 ４．１．２．１．７ 匀 浆 器
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