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版权所有·禁止翻制、电子发售 中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准 犛犖／犜２８５６ —２０１１ 非 洲 马 瘟 检 疫 技 术 规 范 犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲 狆狉狅狋狅犮狅犾犳狅狉 犃犳狉犻犮犪狀 犺狅狉狊犲狊犻犮犽狀犲狊狊 ２０１１０５３１ 发 布 ２０１１１２０１ 实 施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 版权所有·禁止翻制、电子发售 犛犖／犜２８５６ —２０１１ 前 言 本 标 准 按 照 ＧＢ／Ｔ１．１—２００９ 给 出 的 规 则 起 草 。 本 标 准 参 考 了 国 际 动 物 卫 生 组 织 《陆 生 动 物诊 断 试 验 与 疫 苗 手 册 》（２００８ 版 ）中 ２．５．１ 章 “非 洲 马 瘟 诊 断 技 术”。 本 标 准 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。 本 标 准 起 草 单 位 ：中 华 人 民 共 和 国山 东 出 入 境 检 验 检 疫 局 、中华 人 民 共 和 国 深 圳出 入 境 检 验 检 疫 局 、中 华 人 民 共 和 国 云 南 出 入 境 检 验 检 疫局 、中 华 人 民 共 和 国 北 京 出 入 境 检 验 检 疫 局。 本 标 准 主 要 起 草 人 ：邓明 俊 、肖西 志 、朱来 华 、凌 宗 帅、郑 小 龙 、孙敏 、梁 成珠 、花 群 义 、周晓 黎、 高 志 强 。 Ⅰ 版权所有·禁止翻制、电子发售 犛犖／犜２８５６ —２０１１ 非 洲 马 瘟 检 疫 技 术 规 范 １ 范 围 本 标 准 规 定 了 非 洲 马 瘟 的 临 床 诊 断 要 点 、非洲 马 瘟 实 验 室 病 毒 分 离 技 术 、反 转 录 聚 合 酶 链 式 反 应 技 术 （ＲＴＰＣＲ）、实 时 荧 光ＲＴＰＣＲ检 测 技 术、ＲＴＰＣＲ分 型 鉴 定 技 术 、血清 中 和 试 验 （ＳＮＴ ）、酶联 免 疫 吸 附 试 验 （ＥＬＩＳＡ）等 实 验 室 操 作 的 技 术 要 求。 本 标 准 适 用 于 进 出 口 马 、驴 、骡 等 马 属动 物 非 洲 马 瘟 的 检 疫 、诊 断 和 血 清 学 调 查。 ２ 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是注 日 期 的 引 用 文 件 ，仅 注 日 期的 版 本 适 用 于 本 文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ，其 最 新 版 本 （包括 所 有 的 修 改 单 ）适 用 于 本 文 件。 ＧＢ／Ｔ６６８２ 分 析 实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法 ＧＢ １６５４８ 病 害 动 物 和 病 害 动 物产 品 生 物 安 全 处 理 规 程 ＧＢ／Ｔ１８０８８ 出 入 境 动 物 检 疫 采 样 ＧＢ １９４８９ 实 验 室 生 物 安 全 通用 要 求 ３ 临 床 诊 断 ３．１ 发 病 症 状 首 先 使 个 体 或 群 体 马 保 持 安 静 ，观 察 其 精神 状 态 、呼 吸 状 况 、站 立 姿 势 ；注意 观 察 头 部 、颜 面 及 体 表 是 否 出 现 特 征 性 水 肿 。 其 次 ，观 察 马 匹 运 动 状况 ，是 否 有 行 动 迟 缓 、行 为 异 常等 现 象 。 在 临 床 诊 断 观 察 中 应 重 点 注 意 以 下 几 点： ａ） 马匹 表 现 出 严 重 的 呼 吸 道 症 状 ，呼 吸 频 率 达 ６０次／ｍｉｎ甚 至 ７５ 次／ｍｉｎ，出 现 不 同 程 度的 呼 吸 困 难 ，在 数 小 时 内 突 然 死 亡； ｂ） 马 匹 站 立 时 前 腿 分 开 、头 向 前 伸 、鼻 孔 扩大 ，呈 现 出 痉 挛 性 咳 嗽 ，同时 从 鼻 孔 向 外 流 出泡 沫 样 液 体； ｃ） 马 匹呈 现 急 性 发 热 或 弛 张 型 发 热 ，持 续 １ ｄ～２ ｄ 或 ５ ｄ～８ｄ，最高 体 温 可 达 ４０ ℃ ～４１℃ ｄ） 出 现 特 征 性 水 肿 ，主 要 表 现 在 颜 部 、眶 上 窝 和 眼 睑 、嘴唇 、面 颊 、舌 部 、下 颌 骨 间 ，有的 皮 下 水 肿 可 扩 展 到 颈 部 至 胸 部； ； ｅ） 结膜 和 舌 腹 侧 以 及 皮 下 有 出 血 点； ｆ） 厌 食 和 精神 抑 郁 ，有 的 烦 躁 不 安 ，表 现 出 类 似 疝 痛 症 状。 非 洲 马 瘟 相 关 资 料 参 见 附 录Ａ。 ３．２ 病 理 变 化 病 理 剖 检 应 注 意 观 察 以 下 要 点： ａ） 项韧 带 水 肿； ｂ） 畜 体 肌 肉 间 隙 水 肿 并 呈 胶 冻 样； ｃ） 多 处组 织 淤 血 并 形 成 大 量 淤 斑； １ 版权所有·禁止翻制、电子发售 犛犖／犜２８５６ —２０１１ ｄ） 肺 部 组 织 水 肿 （近 一 半 感 染 动 物 出 现 这 一 特 征）； ｅ） 皮下 组 织 呈 现 黄 色 胶 冻 样 水 肿； ｆ） 心 包 积 水、体 内 大 量 腹 水； ｇ） 盲 肠 和 结 肠 浆 膜 表 面 有 很 多 点 状 出 血。 ４ 实 验 室 诊 断 ４．１ 病 毒 分 离 鉴 定 注 ： 非 洲 马 瘟 病 毒 分 离 操 作 过 程应 该 在 具 有 三 级 生 物 安 全 的 实 验室 内 完 成。 ４．１．１ 试 剂 与 材 料 ４．１．１．１ Ｖｅｒｏ 细 胞 或ＢＨ Ｋ２１ 细 胞。 ４．１．１．２ ＲＰＭＩ１６４０ 培 养 基 或 其他 等 效 培 养 基。 ４．１．１．３ 胎 牛 血 清。 ４．１．１．４ 青 霉 素 、链 霉 素 。 ４．１．１．５ 肝 素。 ４．１．１．６ 各 种 常 规 试 剂 及 细
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