文本描述
版权所有·禁止翻制、电子发售 中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准 犛犖／犜２８３３ —２０１１ 委 内 瑞 拉 马 脑 脊 髓 炎 检 疫 技 术 规 范 犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲 狆狉狅狋狅犮狅犾犳狅狉狏犲狀犲狕狌犲犾犪狀 犲狇狌犻狀犲 犲狀犮犲狆犺犪犾犻狋犻狊 ２０１１０２２５ 发 布 ２０１１０７０１ 实 施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 犛犖／犜２８３３ —２０１１ 版权所有·禁止翻制、电子发售 前 言 本 标 准 按 照 ＧＢ／Ｔ１．１—２００９ 给 出 的 规 则 起 草 。 本 标 准 修 改 采 用 了 世 界 动 物 卫 生 组 织 公 布的 《陆 生 动 物 手 册 》（２００９年 版 ）第 ２．５．１４章 “委内 瑞 拉 马 脑 脊 髓 炎 ”。 除 编 辑 性 修 改 外 ，主 要 技 术变 化 如 下： ——— 细 化 了 间 接 免 疫 荧 光 分 型 试 验 方 法； ——— 增 加 了 血 凝 试 验 内 容； ——— 修 改 了 ＩｇＭ捕 获 的 底 物 作 用 时 间 为 ３０ ｍｉｎ～３５ ｍｉｎ ； ＥＬＩＳＡ ——— 删 除 了 补 体 结 合 试 验。 本 标 准 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。 本 标 准 起 草 单 位 ：中 华 人 民 共 和 国 重 庆 出入 境 检 验 检 疫 局 、重 庆 市 进 出 口 食 品 安 全 工 程 技 术 研 究 中 心 、中 华 人 民 共 和 国 山 东 出 入 境 检 验 检 疫局。 本 标 准 主 要 起 草 人 ：王 昱 、肖 进 文 、李应 国 、聂 福 平 、刘 生 峰 、王 国 民 、李 贤 良 、朱 来 华 、周启 明。 Ⅰ 犛犖／犜２８３３ —２０１１ 版权所有·禁止翻制、电子发售 委 内 瑞 拉 马 脑 脊 髓 炎 检 疫 技 术 规 范 １ 范 围 本 标 准 规 定 了 委 内 瑞 拉 马 脑 脊 髓 炎 的 病 毒 分离 、间 接 免 疫 荧 光 分 型 试 验 、血 凝抑 制 试 验 、ＩｇＭ捕 获 ＥＬＩＳＡ和 蚀 斑 减 数 中 和 试 验 的 技 术要 求。 本 标 准 适 用 于 进 出 境 动 物 的 委 内 瑞 拉 马 脑 脊髓 炎 检 疫。 ２ 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是注 日 期 的 引 用 文 件 ，仅 注 日 期的 版 本 适 用 于 本 文 件 。 凡 是 不 注 明 日 期 的 引 用 文 件 ，其 最 新 版 本 （包括 所 用 的 修 改 单 ）适 用 于 本 文 件。 ＧＢ／Ｔ１８０８８ 出 入 境 动 物 检 疫 采 样 ３ 缩 略 语 下 列 缩 略 语 适 用 于 本 文 件。 ＶＥＥ （ｖｅｎｅｚｕｅｌａｎ ｅｑｕｉｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ）：委内 瑞 拉 马脑 脊 髓 炎 ＥＥＥ （ｅａｓｔｅｒｎ ｅｑｕｉｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ）：东方 型 马 脑 脊 髓 炎 Ｗ ＥＥ （ｗｅｓｔｅｒｎ ｅｑｕｉｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ）：西方 型 马 脑 脊 髓 炎 ＲＫ１３细 胞 系 （ｒａｂｂｉｔ ｋｉｄｎｅｙ１３ ｃｅｌｌｌｉｎｅ）：兔肾 细 胞 系 Ｖｅｒｏ 细 胞 系 （ａｆｒｉｃａｎ ｇｒｅｅｎ ｍｏｎｋｅｙｋｉｄｎｅｙ ｃｅｌｌｌｉｎｅ）：非洲 绿 猴 肾 细 胞 系 ４ 生 物 安 全 要 求 本 标 准 的 病 毒 分 离 、间 接 免 疫 荧 光 分 型 试验 和 蚀 斑 减 数 中 和 试 验 ，均 需 要 在 生 物 安 全 Ⅲ 级 以 上 的 实 验 室 进 行 。 人 员 需 提 前 进 行ＶＥＥ疫 苗 免 疫 ，蚀 斑 减 数 中 和 抗 体 滴 度 在 １∶２０以 上 。 ５ 样 品 采 集 ５．１ 试 剂 和 材 料 采 血 针 、离 心 管 、样 品 瓶 、手 术 镊 子、开 颅 钳 、断 骨 刀 、手 术 剪 刀 、样 品 缓 冲 液 （配 制 见Ａ ．１．３）、柠檬 酸 钠 抗 凝 剂 （配 制 见 Ａ ．１．４）。 ５．２ 采 样 数 量 和 类 型 采 样 的 数 量 按 照ＧＢ／Ｔ１８０８８ 的要 求 执 行 。 样 品 类 型 包括 ：全 血 、血 清 、脑脊 液 、组 织 ［脑 和（或） 脊 髓］。 １ 犛犖／犜２８３３ —２０１１ 版权所有·禁止翻制、电子发售 ５．３ 采 集 方 法 ５．３．１ 血 液 样 品 无 菌 采 集 １０ ｍＬ～ １５ ｍＬ全 血 ，立 即 转 至 含 柠檬 酸 钠 抗 凝 剂 （终浓 度 为 １０ ％ ）的 离 心 管 中 ，低温 运 送。 ５．３．２ 血 清 样 品 每 头 动 物 采 集 全 血 １０ ｍＬ～１５ ｍＬ，提 取 血 清 ３ ｍＬ以 上 ，低 温 运 送 到 实 验 室。 ５．３．３ 脑 脊 液 样 品 无 菌 采 集 脑 脊 液 １ ｍＬ以 上 ，立 即 低 温 运 送 到 实 验 室。 ５．３．４ 组 织 样 品 无 菌 采 取 动 物 的 脑 、脊 髓 ，存 放 于 无菌 样 品 瓶 ，低 温 ４８ ｈ 内 运 送 到实 验 室 。 如 果 ４８ ｈ 内 无 法 运 送 到 实 验 室 ，则 需 干 冰 冷 冻 运 送。 ６ 病 原 分 离 鉴 定 ６．１ 病 毒 分 离 ６．１．１ 设 备 和 器 材 低 温 冰 箱 、超 低 温 冰 箱 、二 氧 化 碳 培 养 箱、冷 冻 离 心 机 （≥３ ０００犵 ）、生物 安 全 柜 （ＣｌａｓｓⅡ 以 上 ）、倒置 光 学 显 微 镜 、细 胞 瓶 、注 射 器 、移 液器 （１．０ ｍＬ ～１０ｍＬ ）及 配套 枪 头。 ６．１．２ 试 剂 和 材 料 ６．１．２．１ ＲＫ１３和 （或 ）Ｖｅｒｏ 细 胞。 ６．１．２．２ Ｍ Ｅ Ｍ 培 养 基。 ６．１．２．３ ３日
==>> 点击下载文档
