文本描述
版权所有·禁止翻制、电子发售 中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准 犛犖／犜２７６６ —２０１１ 国 境 口 岸 螨 类 携 带 汉 坦 病 毒 的 检 测 方 法 犚犜犘犆犚 犚犜犘犆犚犱犲狋犲犮狋犻狀犵 犿犲狋犺狅犱 犳狅狉 犺犪狀狋犪狏犻狉狌狊犻狀 犿犻狋犲犪狋犳狉狅狀狋犻犲狉狆狅狉狋 ２０１１０２２５ 发 布 ２０１１０７０１ 实 施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 犛犖／犜２７６６ —２０１１ 版权所有·禁止翻制、电子发售 前 言 本 标 准 按 照 ＧＢ／Ｔ１．１—２００９ 给 出 的 规 则 起 草 。 本 标 准 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。 本 标 准 起 草 单 位 ：中 华 人 民 共 和 国 北 京 出入 境 检 验 检 疫 局 、军 事 医 学 科 学 院微 生 物 流 行 病 研 究 所、 中 华 人 民 共 和 国 辽 宁 出 入 境 检 验 检 疫 局。 本 标 准 主 要 起 草 人 ：郭 天 宇 、刘 佳 、任彤 、刘 艳 华 、郭 敏 卓 、刘 韦 华 、左 曙 青 、宋 锋 林。 Ⅰ 犛犖／犜２７６６ —２０１１ 版权所有·禁止翻制、电子发售 国 境 口 岸 螨 类 携 带 汉 坦 病 毒 的 检 测 方 法 犚犜犘犆犚 １ 范 围 本 标 准 规 定 了 采 用 ＲＴＰＣＲ 方 法 检 测 螨 类携 带 汉 坦 病 毒 汉 滩 型 （Ｈ ＴＮ）、汉 城 型 （ＳＥＯ）的 检 测 对 象 、检 测 方 法 、结 果 报 告 和 实 验 室 生 物安 全 要 求。 本 标 准 适 用 于 出 入 境 检 验 检 疫 机 构 对 螨 携 带汉 坦 病 毒 Ｈ ＴＮ 型、ＳＥＯ型 的 检 测。 ２ 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是注 日 期 的 引 用 文 件 ，仅 注 日 期的 版 本 适 用 于 本 文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ，其 最 新 版 本 （包括 所 有 的 修 改 单 ）适 用 于 本 文 件。 ＧＢ １９４８９ 实 验 室 生 物 安 全 通用 要 求 ＳＮ／Ｔ１５５２ 国 境 口 岸 生 物 因 子 恐 怖 事 件 监 测 规 程 ３ 术 语 和 定 义 下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件。 ３．１ 螨 类 犿犻狋犲狊 节 肢 动 物 门 蛛 形 纲 （Ａｒａｃｈｎｉｄａ）蜱螨 亚 纲 （Ａｃａｒｉｎａ）中除 蜱 以 外 的所 有 种 类 的 统 称 。 本 标 准 涉 及 的 螨 类 是 指 在 医 学 上 有 重 要 意 义 的 吸 血 兼 掠 食型 和 吸 血 型 螨 类。 ３．２ 汉 坦 病 毒 犺犪狀狋犪狏犻狉狌狊 布 尼 亚 病 毒 科 汉 坦 病 毒 属 ，单 股 负 链ＲＮ Ａ 病 毒 ，在我 国 主 要 流 行 为 汉 滩 型 和汉 城 型 ，是 肾 综 合 征 出 血 热 （ＨＦＲＳ）的 病 原 体。 ４ 生 物 安 全 措 施 ４．１ 个 人 防 护 采 集 螨 类 标 本 时 注 意 做 好 个 人 防 护 ，避 免螨 虫 叮 咬 。 个 人 防 护 办 法 可 参 照 ＳＮ／Ｔ１５５２ 。 ４．２ 实 验 室 生 物 安 全 要 求 样 品 前 处 理 和 病 原 体 检 测 应 在 生 物 安 全 ２ 级 及以 上 实 验 室 进 行 。 实 验 室 应 遵 循ＧＢ １９４８９ 对生 物 安 全 ２ 级 及 以 上 实 验 室 的 生 物 安 全 要 求。 ４．３ 消 毒 措 施 实 验 前 后 使 用 有 效 的 紫 外 灯 照 射 消 毒１５ ｍｉｎ，紫外 灯 需 要 定 期 检 测 、更换 。 实 验 完 毕 后 所 有 可用 １ 犛犖／犜２７６６ —２０１１ 版权所有·禁止翻制、电子发售 高 压 消 毒 的 器 材 均 应 在 实 验 室 内 进 行 高 压 消毒 ；不 能 用 高 压 消 毒 的 器 材 及 实 验 台面 和 污 染 的 设 备 表 面 用 ７５ ％ 酒 精 消 毒 。 实 验 废 弃 物 应 遵 照 ＧＢ１９４８９ 对 废 弃 物 的 处 理 要 求 进 行 无 害 化 处理。 ５ 器 材 与 试 剂 ５．１ 器 材 ＰＣＲ扩 增 仪 、电 泳 仪 及 电 泳 槽 、高 速 台式 冷 冻 离 心 机 、玻 璃 研 磨 器或 匀 浆 器 、液 氮 罐 、冰 箱 （温度 范 围 包 括 ２ ℃ ～８℃ 和 －２０ ℃～ －８０ ℃ ）、生 物安 全 柜 、凝 胶 成 像 系 统 、水 浴 锅 、微 量 移 液器 及 配 套 带 滤 芯 吸 头 （１０ μＬ 、１００ μＬ 、１０００ μＬ ）、离 心 管 （１．５ｍＬ 、０．５ｍＬ 和 ０．２ｍＬ ）、微 波 炉。 所 有 耗 材 （离 心 管 、吸 头 、玻 璃 研磨 器 或 匀 浆 器 等 ）都 应 不 含有 ＲＮ Ａ 酶 ，如不 能 保 证 则 可 用 焦 碳 酸 二 乙 酯 （ＤＥＰＣ）水 或 其 他 清 除 ＲＮ Ａ酶 的 试 剂 处 理 。 玻 璃 器 皿 需 在 ３００ ℃ 干 烤 ４ ｈ。 整 个 ＲＮ Ａ制 备 的 操 作 过 程 中 应 戴 无 粉 乳 胶 手 套。 ５．２ 常 用 试 剂 ５．２．１ 实 验 用 溶 液 用 于 ＲＮ Ａ制 备 和 反 转 录 过 程 所 用 的 溶 液 都 应 保 证 不 含 有ＲＮ Ａ 酶 ，如 不 能保 证 需 用 ＤＥＰＣ处理， 以 使 ＲＮ Ａ酶 失 活 （但 用 ＤＥＰＣ处 理 含 有Ｔｒｉｓ 的 溶 液 效 果 不 好）。 ＤＥＰＣ处 理 溶 液 ：１００ｍＬ 溶 液 中 加 入 ０．２ｍＬ ＤＥＰＣ，剧 烈振 荡 使 ＤＥＰＣ溶 于 溶 液中 ，３７ ℃ （温 箱） 处 理 ２４ ｈ，高 压 以 灭活 残 留 的 ＤＥ
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