ICS65.020 B 61 DB22 备案号：42283-2014 吉林省地方标准 DB 22/T 2083—2014 食用菌菌种真实性鉴定RAMP法 Verification of genuineness for edible mushroom spawn — RAMP 2014-05-04发布 2014-06-01实施 吉林省质量技术监督局 发 布   DB22/T 2083—2014 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2001 给出的规则起草。 本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由吉林省农业委员会提出并归口。 本标准起草单位：吉林农业大学。 本标准主要起草人：宋慧、刘晓龙、金周雨、汤海峰、宗立立、李雨婷、王健、谭旭华、李艳丽。 I   DB22/T 2083—2014 食用菌菌种真实性鉴定RAMP法 1范围 本标准规定了利用RAMP技术鉴定食用菌菌种真实性的分析步骤、结果记录、分析鉴定的方法。 本标准适用于猴头菌（Hericiumerinaceus）、小刺猴头菌（Hericiumcaput-medusae）、珊瑚状 猴头菌（HericiumcoralloidesPers）、黑木耳（Auriculariaauricular）和光帽鳞伞（Pholiotanameko） 食用菌菌种真实性的鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 12728食用菌术语 3术语和定义 GB/T 12728 界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 随机扩增微卫星DNA多态性标记Random Amplified Microsatellite Polymorphism（RAMP） 是以1条与微卫星序列互补的SSR引物和1条RAPD随机引物相组合，对基因组中的微卫星序列与 随机引物互补序列之间的DNA片段进行随机扩增的技术。 3.2 菌种真实性 Verification of Spawn 供检菌种与对照菌种的符合性 4RAMP标记原理 采用RAMP标记扩增基因组中微卫星序列与随机引物互补序列之间的DNA片段，通过比较试样与对照 指纹图谱，从而对菌种进行鉴定。 5仪器设备及试剂 见附录A。 6溶液配制 1