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版权所有·禁止翻制、电子发售 中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准 犛犖／犜２７５４ ．２—２０１１ 出 口 食 品 中 致 病 菌 环 介 导 恒 温 扩 增 （犔犃 犕犘）检测 方 法 第 ２ 部 分 ：大 肠 杆 菌 犗１５７ 犔狅狅狆犿犲犱犻犪狋犲犱犻狊狅狋犺犲狉犿犪犾犪犿狆犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀犱犲狋犲犮狋犻狅狀 犿犲狋犺狅犱 犳狅狉 狆犪狋犺狅犵犲狀狊 犻狀 犲狓狆狅狉狋犳狅狅犱 — 犘犪狉狋２：犈狊犮犺犲狉犻犮犺犻犪犮狅犾犻犗１５７ ２０１１０２２５ 发 布 ２０１１０７０１ 实 施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 犛犖／犜２７５４ ．２—２０１１ 版权所有·禁止翻制、电子发售 前 言 ＳＮ／Ｔ２７５４ 《出 口 食 品 中 致 病 菌 环 介 导 恒 温 扩 增 （ＬＡ Ｍ Ｐ）检测 方 法 》共 分 为 １５ 个 部 分： ——— 第 １ 部 分 ：金 黄 色 葡 萄 球 菌； ——— 第 ２ 部 分 ：大 肠 杆 菌Ｏ１５７ ； ——— 第 ３ 部 分 ：志 贺 氏 菌； ——— 第 ４ 部 分 ：单 核 细 胞 增 生 李 斯 特菌； ——— 第 ５ 部 分 ：副 溶 血 性 弧 菌； ——— 第 ６ 部 分 ：小 肠 结 肠 炎 耶 尔 森 氏菌； ——— 第 ７ 部 分 ：空 肠 弯 曲 菌； ——— 第 ８ 部 分 ：肺 炎 克 雷 伯 氏 菌； ——— 第 ９ 部 分 ：溶 血 性 链 球 菌； ——— 第 １０ 部 分 ：产 气 荚 膜 梭 菌 ； ——— 第 １１ 部 分 ：产 霍 乱 毒 素 的霍 乱 弧 菌； ——— 第 １２ 部 分 ：溶 藻 弧 菌； ——— 第 １３ 部 分 ：创 伤 弧 菌； ——— 第 １４ 部 分 ：假 结 核 耶 尔 森氏 菌； ——— 第 １５ 部 分 ：阪 崎 肠 杆 菌。 本 部 分 为 ＳＮ／Ｔ２７５４ 的 第２ 部 分。 本 部 分 按 照 ＧＢ／Ｔ１．１—２００９ 给 出 的 规 则 起 草。 请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利 。 本 文 件的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 这 些 专 利 的 责 任。 本 部 分 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。 本 部 分 起 草 单 位 ：中 华 人 民 共 和 国天 津 出 入 境 检 验 检 疫 局 、中华 人 民 共 和 国 北 京出 入 境 检 验 检 疫 局 、中 华 人 民 共 和 国 江 门 出 入 境 检 验 检 疫局 、中 华 人 民 共 和 国 广 东 出 入 境 检 验检 疫 局 、中 华 人 民 共 和 国 山 西 出 入 境 检 验 检 疫 局 、广 州 华 峰 生 物 科技 有 限 公 司。 本 部 分 主 要 起 草 人 ：郑 文 杰 、刘伟 、张 敏 爱 、张宏 伟 、易 敏 英 、侯丽 萍 、蔡 国 瑞 、张霞 、曾 静 、李 志 勇、 孙 慈 惠 、凌 莉 、曹 以 诚 、高 东 微。 Ⅰ 犛犖／犜２７５４ ．２—２０１１ 版权所有·禁止翻制、电子发售 出 口 食 品 中 致 病 菌 环 介 导 恒 温 扩 增 （犔犃 犕犘）检测 方 法 第 ２ 部 分 ：大 肠 杆 菌 犗１５７ １ 范 围 ＳＮ／Ｔ２７５４ 的 本 部 分 规 定 了 检 测出 口 食 品 中 大 肠 杆 菌 Ｏ１５７的 环 介 导 恒 温 核 酸 扩 增 （ＬＡ Ｍ Ｐ）法 。 本 部 分 适 用 于 出 口 食 品 中 大 肠 杆 菌Ｏ１５７ 的 筛 选 检 测。 ２ 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是注 日 期 的 引 用 文 件 ，仅 注 日 期的 版 本 适 用 于 本 文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ，其 最 新 版 本 （包括 所 有 的 修 改 单 ）适 用 于 本 文 件。 ＧＢ／Ｔ４７８９ ．６ 食 品 卫 生 微 生 物 学检 验 致 泻 大 肠 埃 希 氏 菌 检 验 ＧＢ／Ｔ６６８２ 分 析 实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法 ＧＢ １９４８９ 实 验 室 生 物 安 全 通用 要 求 ＧＢ／Ｔ２７４０３ 实 验 室 质 量 控 制 规 范 食 品 分 子 生 物 学 检 测 ３ 生 物 安 全 措 施 为 了 保 护 实 验 室 人 员 的 安 全 ，应 由 具 备 资格 的 工 作 人 员 检 测 大 肠 杆 菌Ｏ１５７ ，所 有 培 养 物 和 废 弃物 应 按 照 ＧＢ １９４８９中 的 有 关 规 定 执 行。 ４ 防 污 染 措 施 防 止 污 染 措 施 应 符 合 ＧＢ／Ｔ２７４０３的 规 定。 ５ 缩 略 语 下 列 缩 略 语 适 用 于 本 文 件。 Ｂｅｔａｉｎｅ：甘氨 酸 三 甲 内 盐 犅狊狋 酶 ［犅狊狋 ＤＮ Ａ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（ｌａｒｇｅｆｒａｇｍｅｎｔ）］：犅狊狋ＤＮＡ 聚 合 酶 （大 片 段） ＤＮ Ａ （ｄｅｏｘｙｒｉｂｏｎ ｕｃｌｅｉｃａｃｉｄ）：脱氧 核 糖 核 酸 ｄＮＴＰ（ｄｅｏｘｙｒｉｂｏｎ ｕｃｌｅｏｓｉｄｅｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ）：脱氧 核苷 三 磷 酸 ＥＤＴＡ（ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃａｃｉｄ）：乙二 胺 四 乙 酸 ＬＡ Ｍ Ｐ（ｌｏｏｐｍｅｄｉａｔｅｄｉｓｏｔｈｅｒｍａｌａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ）：环 介 导 恒温 核 酸 扩 增 Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ１００ ：聚 乙 二 醇 辛 基 苯 基 醚 ６ 技 术 概 要 根 据 大 肠 杆 菌 Ｏ１５７的 狉犳犫犈 基 因 序列 （参 见 附 录 Ａ ）设 计 的内 、外 引 物 及 环 状 引 物 各一 对 ，特 异 性 １ 犛犖／犜２７５４ ．２— ２０１１ 版权所有·禁止翻制、电子发售 识 别 靶 序 列 上 的 八 个 独 立 区 域 ，利
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