ICS 65.020 ICS 65.020 DB22 吉 林省地 方标准 DB 22/T 3090—2019 绵羊幼畜超排技术规程 Juvenile in vitro embryo transfer technology standards regulations on sheep 2019-12-25发布 2020-02-01实施 吉林省市场监督管理厅发布 本标准仅供内部使用 本标准仅供内部使用 印 本标准仅供内部使用 不得翻 印 前言 前言 关宏、马骏、柴浩晨、吴翠玲、宗兴龙、刘克雄、田浩、张玉梅、齐琪、段增祎。 DB22/T 3090—2019 本标准仅供内部使用 本标准仅供内部使用 印 本标准仅供内部使用 不得翻 印 DB22/T 3090—2019 绵羊幼畜超排技术规程 范围 本标准规定了绵羊幼畜超排的技术流程图、卵母细胞采集、体外受精、胚胎鉴定和胚胎移植。 本标准适用于绵羊幼畜超排技术操作。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 826 绵羊胚胎移植技术规程 NY/T 1571 羊胚胎移植技术规程 NY/T 1674 牛羊胚胎质量检测技术规程 NY/T 1900 畜禽细胞与胚胎冷冻保种技术规范 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 幼畜超排 juvenile in vitro embryo transfer 处理诱导卵母细胞发育、活体采卵、卵母细胞体外成熟、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术的 过程。 超数排卵 superovulation 在母羊发情周期的适当时间，施以外源促性腺激素，促使母畜比自然状态有更多卵泡发育并排卵。 从幼畜获取卵母细胞进行胚胎体外生产和移植的一套完整的综合技术体系，包括性成熟前动物激素 同期发情 estrus synchronization 通过外源激素处理等人为手段调整母羊的发情周期，使其在预定时间内集中发情的技术。 3.4 供体 donor 提供用于胚胎生产的卵母细胞的4-8周龄母羔羊。 3.5 受体 receptor 接受胚胎移植的成年母羊。 3.6 卵母细胞采集 oocytes collection 使用冲卵液将发育到一定时期的卵母细胞从卵巢中采集回收的过程。 将胚胎植入到同期发情的母羊输卵管或子宫内的过程。 将胚胎植入到同期发情的母羊输卵管或子宫内的过程。 精子在体外经获能因子诱导，增加精子受精能力，改变膜的通透性，降低顶体膜稳定性，使精子辨 识卵子，穿入卵子受精的过程。 技术流程图 绵羊幼畜超排技术流程如图1所示。获得的卵母细胞和胚胎在体外进行操作时，应置于37 ℃恒温台 上，所用液体试剂应预热至38.5 ℃再进行使用。 DB22/T 3090—2019 胚胎移植 embryo transfer 本标准仅供内部使用 不得翻印 不得翻印 图1 绵羊幼畜超排技术流程图 5 卵母细胞采集 2 周期 周期 11日12日13日14日15日16日20～22日 供卵羊 注射1次 PMSG 330 IU/只 注射 FSH 30 IU/只。 每天2次， 间隔 12 h 注射 FSH 30 IU/只。 每天2次， 间隔 12 h 注射 FSH 30 IU/只。 每天2次， 间隔 12 h 手术采卵 不得翻印 受体羊 放置 阴道 栓 撤栓，注射 PMSG 400 IU/只 试请 试情 胚胎移植 胚胎移植 卵母细胞、胚胎 卵母细胞 体外成熟 卵母细胞 体外受精 2～4 细胞期 桑葚胚、 囊胚 DB22/T 3090—2019 5.1 供体、受体选择 5.1.1 选择健康、繁育性能良好的成年母羊作为受体，将放置阴道栓当天记为第 0天，第 13天撤栓并 注射PMSG 400 IU/只，进行同期发情处理。 5.1.2 选择 4周龄～8周龄，体重在 5 kg～15 kg，有完整系谱档案的健康母羔作为供体。与母羊同圈 饲养，适量补饲羔羊料。。。。。。。以下内容略