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长兴扬子鳄遗传多样性及重引入工程的可行性研究报告

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更新时间:2021/8/5(发布于江苏)

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文本描述
#4-#!!-1,#!!#,!!!!,一#!!#!!8-,!,! 一4 第一部分文献综述 #,- ,.,8 第一章扬子鳄研究概述,#!#!#-#卜#!,.,9 1命名与分类 -!#-#!#!!!#,#!!!!!#,!!!4!#!#!!,#!!!#!# 一9 2扬子鳄的分布 !#,!#,#!#!#,!#,!-#!,#,#,#,!!-#!!,# 一10 3扬子鳄的种群现状及保护现状,#4#,4#,#,!,-#,#!.,11 4扬子鳄的栖息地现状及研究 ,#!!#,#,4!#,!!#4#!!! , .. -.,11 5分子生物学研究!,!!#,#!!#!1!!!!,#,#,!!-#,#,#!#,!!!,二!!,12 6长兴扬子鳄自然繁育研究中心与长兴扬子鳄种群#-#,#-,#,#,#一14 7本报告的目的和意义#,#!#!!,#!!!!,!!#一,.,-,...15 第二部分研究内容#,二#二,#,二,#17 第二章材料和方法,,#!#,#,#4,18 l材料,!#,!,#,#!4,#,#!,!:#,!#,#,!#!,!一18 1.1样品#,!,#!,1#!#,#!#!#!#一18 1,2试剂1#:#,#4,#,#1-:#,4一20 1,3主要仪器设备,#,#!#,!#,!,#!#!#4!!#!!#!!,#:一20 2方法,,#!#!,#,#-!,21 2.1线粒体DNA控制区序列变异分析#,#,#,4#,4#一21 2.1.1肌肉样品DNA的提取#,!,!#,#,!..,!-,21 2.1.2PCR扩增#!!#!,!-#,#!,#,!!#,!#-#一22 2.1.3DNA克隆4#4#,#4,#4#8#4#~,#一23 2.1.3.1PCR产物的纯化!#!,#,!!#!!!#!#,#.#!#~..,#-23 2.1.3.2感受态细胞的制备#!#-#!-,!!#-1-,一,23 2.1.3.3连接,#4!#,,#4#,一24 2.1.3.4转化#!#,!#,!!#,!!#!.#,!,24 2.1.3.5阳性克隆的筛选与鉴定!#,#!!#,!#!!-,!!#,!,#,#!一24 2.1.4测序#,#,#4#,#,#t,>#,#>#,#,->#,.#.#24 2.1.5数据分析!!!!4!!#,!#,!!#!#!#!!!!#,!!#,!!#一25 .22微卫星多态性分析!!,#,#!#,!8!#8,#!-!-#,一!25 .22.1DNA提取,#,#,.一25 2.2.2PCR扩增!!!,!!!!!,-!!#!!!#-,!#!#,!一25 2.2.3微卫星位点的筛选#,#1,!,!,-!,!!#8#,!#!1#,!!#,#,一272 , 2 . 3 . 1变性聚丙烯酞胺凝胶的制备一!#>,#4,27 2.2.3.2变性聚丙烯酞胺凝胶电泳!-一#!#8!,-!!!!!!!-#,27 .22 . .33银染#!!#,一!!8#!#8!#!#!,!#!#!#!-#,!.一27 22-4微卫星位点的克隆与测序#.#一27 .22 . 5微卫星位点的数据分析!!!#一!#8#,!,!,!!#!!!,!一.#.一28 .23扬子鳄饲养池及重引入区(桃花沟)水土金属元素背景值的比较研究 #8,#,#,#, 一28 .23.1样品处理,#!>5#!#,#,#4>一28 .23 . 2金属元素的分析测定#!-,#!#,#!!!!!!,!!!,!!-一.//一29 .23 . 3统计学分析-1!#-#!,#1!!!-,1!#!!#,:#一,二29 第三章实验结果!4,#4#!!一#,!#,#,>#一30 1线粒体DNA控制区序列变异分析结果,!#,#!,#!!!#!,#,!!!一30 1.1线粒体DNA控制区5.非重复区检测结果!,#一#,#一30 1.2线粒体DNA控制区VNTR检测结果-#-#,#4,#一30 1.2.1线粒体DNA控制区VNTR的组成#,!,#!#!,!!~#,#一30 1.2.2线粒体DNA控制区VNTR中串联重复对的二级结构#,#,-#!#,#,30 1..23扬子鳄线粒体DNA控制区VNTR的变异特点44#一31 2微卫星检测结果#4!!,#,#!!#!,#,#!,!#!,#41#!#!,.#.#,34 2.1微卫星位点的选择,#!#-!!!,!#!,!#,#,#!!,#!#,一34 .22微卫星位点测序结果#,-#,#!户,#4#一34 .23微卫星位点的数据分析!#!#!,#!!4-#!#,一.//.!-0/-.47 .23.1等位基因的大小!频率与分布#,#-#,#!!一47 .23.2杂合度与多态信息含量!#4#4,#,#4#一48 .23.3Har勿一weinbegr平衡与连锁不平衡!#!#,!!#!#,49 .23.4基因型#!!!#,!!!#!!,!#-49 .24微卫星位点的有效性,#,!-,-,#,#4#4,#一53 3扬子鳄饲养池及重引入区(桃花沟)水土金属元素背景值的比较研究-!,#,#!一54 3,1长兴扬子鳄自然繁育研究中心饲养池水体金属含量测定结果#,#!!一54 3,2长兴扬子鳄自然繁育中心饲养池土壤金属含量测定结果,44:#,#,#,4#57 3.3长兴扬子鳄器官组织中金属元素含量测定结果!,!#!!!#,#!!!#60 3.4长兴扬子鳄卵中金属含量测定结果#,#!!#,#,-#!#-#!!!,#,67 3.5长兴扬子鳄粪便及食物中金属含量测定结果#4,44#一70 3.6长兴扬子鳄重引入区(桃花沟)水体金属元素含量测定结果,!,!,一71 3.7长兴扬子鳄重引入区(桃花沟)土壤中金属含量测定结果#!#,#,!#,#,#,#-#!#一72 第四章讨论!#,!#,#,!!#1#44#,#,4#,731扬子鳄线粒体DNA控制区的多态性 #4##-#> 731.1扬子鳄线粒体DNA控制区5.非重复序列的多态性!#4#,#,--!!一73 1 . 2扬子鳄线粒体DNA控制区VNTR的多态性及其进化 ,-,!!!!! 一73 1.3扬子鳄mtVNTR区域的世代分化,-#,!,-.#74 2扬子鳄微卫星的多态性 ,-!!#!!!-#!!!,! 一 -.! 一 -! 0/#.-0/一!0-75 2.1微卫星分歧与物种间的比较#!!#,#,!!!!#,!!一#,!!!!,#!#!!-,!#,!-#-!!一75 2.2扬子鳄长兴种群微卫星多态性分析!#,#,4#>,#-一76 2.3扬子鳄微卫星位点)重引入种群遗传结构监测的有效标记,!#!#!一793扬子鳄饲养池及重引入区(桃花沟)水土金属元素背景值的比较研究,#!!,#!#,#,79 3.1长兴扬子鳄器官组织中金属元素含量,#,#,-#,#4#4,4#,4#:,一79 3.2扬子鳄饲养池与重引入区(桃花沟)水土金属元素含量比较#,#,!!!#,!80 3.3扬子鳄饲养池之间水土金属含量差异#!-#,#!#!!#,!,#,#一82 3.4长兴扬子鳄卵中金属积累与重金属污染的检测方法#44,#,83 3.5长兴扬子鳄食物中的金属元素含量!!!!#!!!-,!#~#,一84 第五章对扬子鳄重引入工作的几点建议#1-,86 1长兴扬子鳄种群遗传谱系的构建#4,4,!,86 2长兴扬子鳄重引入种群奠基者的选择!#,#!!#!,!!#86 3遗传监测体系的建立!#4!8,#!!,#!-#!#.0-一.,00/86 第六章