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骺板软骨细胞培养作为半月板组织工程种子细胞的可行性研究

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更新时间:2021/2/17(发布于北京)
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文本描述
中文摘要 目的:种子细胞是制约半月板组织工程进一步临床应用的首要因素,也 是保证组织工程可持续深入研究的前提条件目前用于半月板组织工程 的种子细胞主要有间充质干细胞!多能纤维细胞!半月板纤维软骨细胞 及转基因细胞等;髓板(又称生长板)是位于长骨箭与干髓端之间的具 有纵向生长能力的透明软骨胚胎干细胞经过增殖形成软骨支架,再进 一步分化为关节软骨!半月板及髓板,三种软骨具有共同的细胞发生来 源本实验的目的是:比较培养箭板软骨和半月板软骨细胞的生物学特 性,探讨培养箭板软骨细胞作为半月板组织工程种子细胞的可行性 方法:分别自4周龄新西兰大白兔髓板和半月板分离软骨细胞,行单层 传代培养,取第1代细胞行无支架离心管培养,倒置相差显微镜下动态 观察两种细胞的生物学特性,比较箭板软骨细胞和半月板软骨细胞的生 长曲线,透射电镜观察比较第2!4代髓板软骨细胞及半月板软骨细胞的 超微结构,另取6周龄新西兰大白兔股骨远端关节软骨!胫骨近端髓板 及半月板,与离心管培养软骨一并行11型胶原免疫组化染色!甲苯胺蓝 染色!藩红/O0染色等组织学观察,以及透射电镜观察比较四种软骨细 胞的超微结构 结果:第4代箭板软骨细胞以及半月板软骨细胞出现去分化,似成纤维 细胞;离心管培养第1代髓板软骨细胞能形成软骨,而半月板软骨细胞 则不能离心管培养形成的软骨有独特的超微结构,与关节软骨及箭板 有一定的相似性,而与半月板有明显区别四种软骨各自有不同的细胞 和细胞外基质特征第2代髓板软骨细胞与第2代半月板软骨细胞以及 第4代箭板软骨细胞与第4代半月板软骨细胞都有不同的细胞超微结构 结论:半月板来源的软骨细胞经离心管培养不能形成软骨组织,离心管 培养第1代髓板软骨细胞能形成软骨,且有独特的超微结构,可能作为 关节软骨与髓板的移植物,不能作为半月板的移植物随着传代次数的 增加,至第4代髓板软骨细胞以及半月板软骨细胞均出现去分化现象, 逐渐失去软骨细胞的特异性表型由本实验可见,兔髓板软骨细胞不能 作为半月板组织工程的种子细胞 〔关键词〕半月板;髓板;组织工程;种子细胞;